[發明專利]一種雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿結合物納米粒子及其制備方法

在審

• 申請號: 201810573516.3
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108653748A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發明（設計）人: 肖萌;曹永麗;鄭督;劉彥雪;雷建都
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/60;A61K31/585;A61K31/4745;A61P35/00;C08G65/331;C08G65/333
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種雷公藤甲素?多臂聚乙二醇?羥基喜樹堿結合物納米粒子及其制備方法，其特征在于，所述的雷公藤甲素?多臂聚乙二醇?羥基喜樹堿結合物由雷公藤甲素、多臂聚乙二醇和羥基喜樹堿通過酯鍵連接形成，多臂聚乙二醇作為親水段、雷公藤甲素和羥基喜樹堿作為疏水段，雷公藤甲素?多臂聚乙二醇?羥基喜樹堿結合物在水溶液中自組裝形成納米粒子。

技術領域

本發明涉一種雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿結合物納米粒子及其制備方法，屬于醫藥和納米醫藥技術領域。

背景技術

雷公藤甲素(Triptolide,TP)又稱雷公藤內酯、雷公藤內酯醇，是從傳統中藥雷公藤中提取出來的環氧二萜內酯類化合物，是雷公藤的主要有效成分之一，具有免疫調節、抗氧化、抗炎、抗類風濕、抗老年性癡呆癥、抗腫瘤等多種生物活性，可以抑制多種腫瘤的生長，及誘導凋亡的功效。近年來對雷公藤甲素的研究逐漸深入，在探索其強大的藥理活性時，也發現了嚴重的不良反應，如對機體的消化系統、循環系統、泌尿系統、生殖系統及免疫系統等比較嚴重的毒副作用，限制了雷公藤甲素在臨床上的廣泛應用。如何降低雷公藤甲素的毒性，同時不影響其藥理活性將會成為研究者關注的焦點。

羥基喜樹堿(10-Hydroxy camptothecin,HCPT)是目前我國臨床上使用較為廣泛的喜樹堿類抗癌藥物，具有廣譜的抗癌作用，但在臨床應用中存在的主要問題是其半衰期短，內酯環對pH敏感，開環后抗癌活性降低且其極難溶于水，為了改善溶解性，HCPT多以開環形式的鈉鹽注射液、粉針應用，療效低且毒副作用大。

傳統大分子聚乙二醇(PEG)(食品級)廣泛應用于藥物修飾，合成步驟簡單，具有良好的水溶性，但其載藥能力低，故本研究以多臂聚乙二醇為載體，制備雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿前藥，增加藥物水溶性、藥物循環半衰期的同時增加載藥量，降低雷公藤甲素和羥基喜樹堿的毒副作用，同時負載兩種抗癌藥物增加了藥物的抗癌作用。在此基礎上，本研究將所制雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿前藥制成納米粒，延長其在體內的循環時間并且可以將藥物特異性釋放于靶組織，起到增加療效并降低毒副作用的效果。

隨著載藥納米粒子體系的發展，該納米藥物載體將在癌癥治療中體現其巨大的優勢和良好的臨床應用前景。

發明內容

本發明的目的是建立一種水溶性雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿前藥納米粒子及其制備方法：首先雷公藤甲素和多臂聚乙二醇通過酯化反應形成多臂聚乙二醇-雷公藤甲素前藥，再將多臂聚乙二醇-雷公藤甲素前藥與羥基喜樹堿通過化學鍵偶聯形成雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿結合物，最后將所得結合物于水中進行自組裝形成水溶性納米粒子。

所述雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿結合物為以下結構：

本發明的技術方案：

(1)水溶性雷公藤甲素-多臂聚乙二醇-羥基喜樹堿結合物的合成路線如下：

多臂聚乙二醇-雷公藤甲素前藥制備，將多臂聚乙二醇分散于四氫呋喃(THF)溶劑中，磁力攪拌15-30分鐘，使其充分溶解；然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)以活化聚乙二醇末端羧基，然后加入催化劑4-二甲氨基吡啶(DMAP)；然后再稱取一定量雷公藤甲素溶于上述溶液中，在35℃條件下磁力攪拌反應48h；反應完成后，向反應液中加入適量無水乙醚，出現白色絮狀沉淀，以轉速4000rpm離心沉淀15min，收集固體沉淀，繼續用適量無水乙醚按上述方法洗滌該沉淀三次，收集白色固體A；

將上述白色固體A溶于一定量去離子水中，在磷酸緩沖液中透析8小時，透析完畢后，將透析溶液冷凍干燥48h，得到固體白色粉末B即為多臂聚乙二醇-雷公藤甲素前藥；