[發明專利]杜鵑芽枯萎病菌實時熒光PCR檢測方法及其專用成套試劑有效
| 申請號： | 201810567491.6 | 申請日： | 2018-06-05 |
| 公開（公告）號： | CN108707689B | 公開（公告）日： | 2022-04-05 |
| 發明（設計）人： | 段維軍;郭立新;段麗君;李雪蓮;張慧麗;陳先鋒 | 申請（專利權）人： | 寧波檢驗檢疫科學技術研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;魏少偉 |
| 地址： | 315000 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 杜鵑 枯萎 病菌 實時 熒光 pcr 檢測 方法 及其 專用 成套 試劑 | ||
1.鑒定杜鵑芽枯萎病菌的成套試劑，由名稱為SA的引物對和名稱為SA-P的探針組成，所述SA由名稱分別為SA-F和SA-R的單鏈DNA組成；
所述SA-F為序列表的序列1所示的單鏈DNA分子；
所述SA-R為序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；
所述SA-P的核苷酸序列為序列表的序列3，所述SA-P的兩端分別帶有熒光報告基團和熒光淬滅基團，所述SA-P的5'末端具有熒光報告基團FAM，3'末端具有熒光淬滅基團MGB。
2.權利要求1所述成套試劑的應用，為如下(b1)、(b2)、(b3)或(b4)：
(b1)鑒定杜鵑芽枯萎病菌；
(b2)制備用于鑒定杜鵑芽枯萎病菌的試劑盒；
(b3)檢測待測樣本是否含有杜鵑芽枯萎病菌；
(b4)制備用于檢測待測樣本是否含有杜鵑芽枯萎病菌的試劑盒。
3.一種試劑盒，包括權利要求1所述成套試劑；所述試劑盒的功能為如下(b1)或(b2)：
(b1)鑒定杜鵑芽枯萎病菌；
(b2)檢測待測樣本是否含有杜鵑芽枯萎病菌。
4.一種鑒定杜鵑芽枯萎病菌的方法，包括：以待測菌的基因組DNA為模板，采用權利要求1所述成套試劑進行實時熒光PCR并檢測熒光信號，如果顯示陽性擴增曲線，待測菌為或候選為杜鵑芽枯萎病菌；如果不顯示陽性擴增曲線，待測菌為或候選為非杜鵑芽枯萎病菌。
5.一種檢測待測樣本是否含有杜鵑芽枯萎病菌的方法，包括：以待測樣本的總DNA為模板，采用權利要求1所述成套試劑進行實時熒光PCR并檢測熒光信號，如果顯示陽性擴增曲線，待測樣本含有或疑似含有杜鵑芽枯萎病菌；如果不顯示陽性擴增曲線，待測菌不含有或疑似不含有杜鵑芽枯萎病菌。
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