[發明專利]具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810564427.2
• 申請日: 2018-06-04
• 公開（公告）號: CN108822116A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: 譚仁祥;林麗萍
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: C07D491/044
• 分類號: C07D491/044;C07D209/36;A61K31/407;A61K31/404;A61P35/02;C12P17/18;C12P17/16;C12R1/645
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

1.具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿，其特征在于，其結構式為：

2.根據權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將炭球菌屬Daldinia光輪層炭殼Daldinia eschscholzii IFB-TL01的菌塊接種于麥芽培養基中，于搖床上，培養2～3天，作為種子液；

(2)將步驟(1)所得的種子液接種到新的麥芽培養基中，繼續培養2～3天，并且分別于24，48，72小時投喂吲哚-3-甲醇，至溶液中的終濃度為1.0mM，同等條件下繼續培養8～10天；

(3)對步驟(2)所得培養液經紗布過濾，濾液用乙酸乙酯萃取，離心、濃縮得到黑色浸膏A；

(4)對步驟(3)所得浸膏A進行硅膠柱層析分段，用石油醚：丙酮進行梯度洗脫，得到7個洗脫部分A1-A7；

(5)取步驟(4)的A3段采用硅膠柱層析，采用石油醚：丙酮梯度洗脫，獲得F1–F7 7個洗脫部位，取F3餾分經Sephadex LH-20柱層析，甲醇洗脫，甲醇洗脫液上高壓制備液相，純化獲得化合物1；

(6)取步驟(4)的A4段經C-18柱層析梯度洗脫，獲得餾分A4a–A4e，餾分A4c經ODS柱梯度洗脫，獲得餾分A4c1–A4c6，A4c5經凝膠柱層析，半制備液相洗脫純化，獲得化合物2。

3.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿的制備方法，其特征在于，

步驟(4)中對所得浸膏A進行硅膠柱層析分段，依次用體積比為100:0,100:5,10:1,5:1,3:1,2:1,1:1的石油醚：丙酮進行梯度洗脫，得到7個洗脫部分A1-A7。

4.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿的制備方法，其特征在于，

步驟(5)中取步驟(4)得到的A3段繼續用體積比為100:2至1:1的石油醚：丙酮梯度洗脫，獲得F1–F7 7個洗脫部位，取其中的F3洗脫部位經Sephadex LH-20柱層析，甲醇洗脫，甲醇洗脫液經高壓制備液相純化，用體積比為70:30的MeOH和H₂O流動相洗脫，獲得化合物1。

5.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的吲哚生物堿的制備方法，其特征在于，

步驟(6)中取步驟(4)得到的A4段(石油醚：丙酮＝5:1洗脫部位)經C-18柱層析，用體積比為30:70至100：0的甲醇/水梯度洗脫，獲得餾分A4a–A4e，取其中餾分A4c經ODS柱，采用體積比40:60至100:0的甲醇/水梯度洗脫，獲得餾分A4c1–A4c6，取其中的A4c5經凝膠柱層析，并用半制備液相純化，并采用體積比為70:30的MeOH和H₂O洗脫純化，獲得化合物2。

6.權利要求1所述的吲哚生物堿在制備抗腫瘤藥物中的應用。

7.權利要求1所述的吲哚生物堿在制備抗白血病中的應用。

8.一種藥物制劑，其特征在于，它包括權利要求1所述的吲哚生物堿。

9.根據權利要求8所述的藥物制劑，其特征在于，所述的制劑為丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑或注射劑。