[發明專利]大豆分子標記及其在檢測大豆種子營養價值中的應用

有效

• 申請號: 201810563288.1
• 申請日: 2018-06-04
• 公開（公告）號: CN108504767B
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 邱麗娟;李俊英;孫如建;李忠峰;孫賓成
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院作物科學研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;魏少偉

本發明公開了大豆分子標記及其在檢測大豆種子營養價值中的應用。本發明公開的大豆分子標記為A1)或A2)：A1)以大豆的基因組DNA為模板，采用引物對A1進行擴增得到的DNA分子；所述A1由名稱分別為A1?F和A1?R的兩條單鏈DNA組成，所述A1?F為與大豆基因組中序列1的第346位上游特異結合的單鏈DNA，所述A1?R為與大豆基因組中序列1的第346位下游特異結合的單鏈DNA；A2)大豆基因組DNA中對應于序列表中序列1的第346位的核苷酸。實驗證明，本發明的大豆分子標記與種子蛋白中11S/7S比值有關，可通過檢測本發明的大豆分子標記和相應的基因型檢測種子蛋白中11S/7S比值。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中，大豆分子標記及其在檢測大豆種子營養價值中的應用。

背景技術

大豆種子蛋白是重要的植物蛋白來源，具有豐富的營養價值。大豆是我國僅次于玉米、小麥和水稻的第四大作物，是我國主要的糧食和油料作物之一。由于大豆具有極高營養價值、高生理活性和廣泛工業用途，世界對大豆的需求日益增加。

大豆種子中70％的貯藏蛋白是球蛋白和β-伴球蛋白。球蛋白和β-伴球蛋白又可稱作為11S球蛋白和7S球蛋白，它們之間又是顯著負相關關系。7S球蛋白的含硫氨基酸比11S球蛋白的含硫氨基酸要低3～4倍，而且大豆的營養價值和含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)的含量密切相關，含硫氨基酸的含量越高，營養價值越高。因此，研究11S球蛋白和7S球蛋白的比值以及含硫氨基酸的含量，對提高大豆營養價值具有重要的價值。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何檢測大豆種子的營養價值，尤其是含硫氨基酸的含量，以及如何檢測大豆種子中11S球蛋白和7S球蛋白的含量及二者的比值。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了一種大豆分子標記，所述大豆分子標記為A1)或A2)：

A1)以大豆的基因組DNA為模板，采用引物對A1進行擴增得到的DNA分子；所述A1由名稱分別為A1-F和A1-R的兩條單鏈DNA組成，所述A1-F為與大豆基因組中序列1的第346位上游特異結合的單鏈DNA，所述A1-R為與大豆基因組中序列1的第346位下游特異結合的單鏈DNA；

A2)大豆基因組DNA中對應于序列表中序列1的第346位的核苷酸。所述大豆分子標記的多態性可為大豆基因組中對應于序列1的第346位為G或A。

所述A1-F可為序列1的第1-20位所示的單鏈DNA，所述A1-R可為與序列1的第1578-1598位反向互補的單鏈DNA。

為解決上述技術問題，本發明還提供了鑒定大豆基因型的方法，所述基因型為GG基因型、GA基因型和AA基因型，所述方法包括如下Ⅰ或Ⅱ或Ⅲ或Ⅳ：

Ⅰ、檢測待測大豆基因組中對應于序列表中序列1的第346位的核苷酸，如所述待測大豆基因組中兩條染色體均為下述g1)的染色體，所述待測大豆為GG基因型；如所述待測大豆基因組中兩條染色體均為下述g2)的染色體，所述待測大豆為AA基因型；如所述待測大豆基因組中兩條染色體中一條為下述g1)的染色體，另一條為下述g2)的染色體，所述待測大豆為GA基因型；

g1)對應于序列表中序列1的第346位的核苷酸為G；

g2)對應于序列表中序列1的第346位的核苷酸為A；

Ⅱ、如下K1)和K2)：

K1)以待測大豆基因組DNA為模板，采用所述A1進行PCR擴增得到PCR產物；

K2)檢測步驟K1)得到的PCR產物的序列，根據所述PCR產物確定大豆基因型：