[發明專利]一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的培養基和方法

有效

• 申請號: 201810537116.7
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108849500B
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 胡中立;李曄;刁英;鄭興汶;汪超;周明全
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 彭勁松

本發明公開了一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的培養基和方法，屬于植物組培快繁技術領域。本發明的培養基包括胚拯救培養基和生根培養基，所述胚拯救培養基為MS+2,4?D 2.0mg/L+6?BA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L+VC 80mg/L，所述生根培養基為MS+NAA 2.0mg/L+6?BA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L。將需要進行胚拯救的蓮種子預處理后依次接種于本發明胚拯救培養基和生根培養基進行誘導培養，即可使其生長并長出根系。本發明解決了未成熟蓮子無法通過常規方法進行生長、繁殖的問題，在短期內可實現組培苗健康快速繁殖生長。本發明操作簡便，易普及，可實現規模化生產。

技術領域

本發明涉及植物組培快繁技術領域，尤其是涉及到一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的培養基和方法。

背景技術

蓮兼具食用和觀賞功能，具有極大的經濟價值。蓮既可無性繁殖也可有性繁殖。在有性繁殖時，蓮子需完全自然成熟，表皮呈褐色，經過自然脫水，其水分含量大幅度下降，體積較先前變小。如果蓮子未成熟，胚就無法自然地發芽生長。大量的花蓮品種無法在自然條件下獲得成熟蓮子。此外，在進行蓮的雜交育種時，有些雜交組合也很難得到成熟蓮子。因此，急需一種有效的技術手段去拯救幼胚，保障其正常發育生長，從而為蓮的遺傳育種及種子繁育提供技術支撐。

植物組織培養是目前進行胚拯救并促進幼苗快速生長發育的一種有效的技術手段。通過在培養基中添加適當、適量的植物激素來促進胚成熟，進而促進其快速生長發育，獲得成活植株。

因此，目前急需采用組織培養的手段，摸索出進行蓮胚拯救的培養基和方法，建立蓮的一種能夠高效、快速的胚拯救技術體系，使得不能正常結籽的蓮也可以獲得后代植株。

發明內容

為了解決未成熟蓮子無法通過常規方法進行有性繁殖的問題，本發明提供一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的培養基及方法，以達到從未成熟蓮子獲得健康后代植株的目的。

本發明提供的一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的培養基，包括胚拯救培養基和生根培養基。其中，所述胚拯救培養基含有如下含量的成分：2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2.0mg/L、6-芐基腺嘌呤(6-BA)0.5mg/L、6-糖基氨基嘌呤(KT)1.0mg/L、抗壞血酸(VC)80mg/L；所述生根培養基包含如下含量的成分：萘乙酸(NAA)2.0mg/L、6-BA 0.5mg/L、KT 1.0mg/L。

優選的，所述胚拯救培養基和生根培養基均以MS培養基為基本培養基。

優選的，所述胚拯救培養基和生根培養基的pH值均為5.8。

優選的，所述胚拯救培養基和生根培養基還含有蔗糖30g/L、植物凝膠1.16g/L，使得培養基呈現半固體狀態。

本發明提供的一種蓮胚拯救及后代快速生長發育的方法，包括如下步驟：將需要進行胚拯救的蓮種子預處理后接種于上述胚拯救培養基上進行誘導培養至發育出叢生芽，再轉移至上述生根培養基進行誘導培養，使其生長并長出根系，成為完整試管苗。

所述方法中，將蓮種子進行預處理的方法優選為：將幼果期的去殼蓮子或受精8-10天的蓮蓬用洗潔精水浸泡，水洗，再先后用酒精、升汞水溶液消毒，無菌水洗，取幼果期蓮子胚乳中的蓮幼胚或受精8-10天的蓮蓬中的子房作為外植體備用；進一步優選為：將幼果期的去殼蓮子或受精8-10天的蓮蓬用洗潔精水浸泡3-10分鐘，流水沖洗干凈，75％酒精消毒5-8分鐘，0.05％升汞浸泡消毒6-8分鐘，無菌水洗5-8次，取幼果期蓮子胚乳中的蓮幼胚或受精8-10天的蓮蓬中的子房作為外植體備用。

所述方法中，兩次進行誘導培養的條件優選均為：溫度28℃，光強1500-1800lux、光照12-14h/d，三周后長出根系成為完整試管苗。

相較于傳統育種方法，本發明具有以下優點和有益效果：