[發明專利]高產奶性能娟姍奶牛選育方法

有效

• 申請號: 201810536719.5
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108823320B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 黃明光;梁金逢;周曉情;肖正中;吳柱月;朱文;方治山;文信旺;彭夏云;潘銳
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區畜牧研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 韋玲雙

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及高產奶性能娟姍奶牛選育方法。本申請選用250條10堿基隨機引物在由20頭高產(305d產奶量4000kg)和20頭低產(305d產奶量3200kg)娟姍牛所組成的2個DNA池間進行RAPD?PCR擴增分子標記篩選方法。用篩選到的200條引物對所有個體進行PCR檢測,得到了3個與奶牛產奶量性狀相關的RAPD標記,并對它們進行了克隆測序以及生物信息學分析。試驗結果表明，有S11、S1110和S1120的DNA片段與產奶量有關，其中S11與產奶量性狀正相關，S1110和S1120與產奶量性狀呈負相關。

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及高產奶性能娟姍奶牛選育方法。

背景技術

娟姍牛是源自英吉利海峽杰茜島的進口奶牛，是英國政府頒布法令保護的珍貴牛種，其最大的優點就是乳質濃厚，乳脂、乳蛋白含量均明顯高于普通奶牛，乳脂率平均為5.5-6%，是乳牛著名的品種。該品種在血統上與瑞士褐牛、德溫牛和凱瑞牛有關系，而與荷斯坦牛沒有關系。在該品種的早期娟姍牛培育過程中，曾被稱為奧爾德尼牛(Alderney)。娟姍牛是主要乳用牛品種中最小的品種之一(凱瑞牛和德克斯特牛更小)。該品種與其他品種相比，耐熱性強并以其采食性好，乳脂、乳蛋白率較高而著稱。

隨著人民生活水平的提高，人們對牛奶的需求量日益增加，如何提高產奶量也一直被畜牧研究者廣泛關注。影響奶奶牛產奶量的因素很多，其中遺傳因素是主要因素之一。因此從基因水平上對奶牛的產奶量性狀進行研究，尋找與產奶量緊密連鎖的分子標記或克隆出控制產奶量的基因，對于進行標記輔助選擇及培育高產娟姍牛，具有十分重要的意義。隨機擴增多態性(Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD) 是由 Williams 和 Welsh在 1990 年發現的一種DNA 多態檢測技術。該技術操作簡便、快捷，結果準確且靈敏度高。此外RAPD 技術在無須事先了解物種的相關分子生物學信息情況下也可以進行相關標記，因此在品種鑒定、系譜分析、突變體檢測、基因定位和遺傳育種等方面領域得到廣泛應用。已有研究者應用 RAPD 技術篩選中國荷斯坦牛產奶量性狀遺傳標記，中國荷斯坦牛的乳脂率是3.5%，相比較娟姍牛乳脂率低很多，并且體型與中國荷斯坦牛相比，娟姍牛會小很多，若是能夠選育出高產奶的娟姍牛，在同等的養殖面積條件下，將遠遠提高養殖的經濟效益。但是迄今在娟姍牛產奶性能目前未見報道。本研究應用RAPD 技術分別對高產娟姍奶牛組和低產娟姍奶牛組的基因組DNA 進行了多態性分析，并對篩選出的與產奶量相關的標記進行克隆測序及生物信息學分析，以期找到與娟姍奶牛產奶量性狀相關的分子標記，為我國南方培育高產娟姍奶牛提供科學依據。

發明內容

鑒于上述內容，有必要提供高產奶性能娟姍奶牛選育方法。

為達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：

高產奶性能娟姍奶牛選育方法，

用標記引物S11，序列為GTAGACCCGT，擴增娟姍奶牛血液中的線粒體DNA，如果能夠擴增出929bp片段或478bp片段，則標志著該娟姍奶牛為高產奶的娟姍奶牛；或

用標記引物S1110，序列為CAGACCGACC擴增娟姍奶牛血液中的線粒體DNA，如果能夠擴增出458bp片段，則標志著該娟姍奶牛為低產奶的娟姍奶牛；或

用標記引物S1120，序列為ACCAACCAGG擴增娟姍奶牛血液中的線粒體DNA，如果能夠擴增出669bp片段，則標志著該娟姍奶牛為低產奶的娟姍奶牛。

進一步說明，所述標記引物的是由以下方法篩選得到的：

（1）、取20頭高產(305 d 產奶量4000 kg)和 20 頭低產(305 d 產奶量 3200kg娟姍牛，頸靜脈采血 10 mL ，EDTA-k2 抗凝，-20 ℃保存；