[發明專利]一種滸苔堿溶性多糖的制備方法

在審

• 申請號: 201810516063.0
• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN108752495A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 劉楠;周德慶;孫永;趙峰;王珊珊
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京開林佰興專利代理事務所(普通合伙) 11692
• 代理人: 劉帥帥

本發明公開了一種滸苔堿溶性多糖的制備方法，包括下列步驟：a.將新鮮的滸苔用清水洗滌，除去泥沙，45℃烘干，干燥后的樣品經粉碎機粉碎，過40目篩。b.超聲。c.熱回流。d.酶解。e.浸提。f.濃縮純沉。g.洗滌。h.純化。本發明的有益效果：本發明的整個工藝過程中無污染物排放，適合于大規模生產，有益于滸苔資源的開發利用。具有該步驟簡單，成本低，可操作性強，產量高的優點，易于工業化生產。滸苔堿性多糖的提取率為16.38%，較文獻報道的13.42%顯著提高。

技術領域

本發明涉及一種滸苔堿溶性多糖的制備方法。屬于海洋微藻養殖領域。

背景技術

滸苔（Enteromotpha）又稱苔條，隸屬于綠藻門（Chlorophyta）石莼目（Ulvales）石莼科（Ulvaceae）滸苔屬（Enteromotpha），常見的種類有綠潮滸苔、緣管滸苔、扁滸苔、條滸苔和腸滸苔等。在我國南北方各海區均有分布，屬東海海域優勢種。滸苔營養豐富，富含碳水化合物、氨基酸，鐵含量是我國食物之最，自古以來滸苔就是我國沿海居民食用和藥用藻類。近年來，由于滸苔的大量繁殖，破壞了海洋環境的生態平衡，甚至造成嚴重的“綠潮”危害，因此如何更好的利用這種海洋資源，變廢為寶成為研究開發的熱點領域。

滸苔多糖是滸苔主要活性成分之一，據報道，滸苔多糖具有免疫調節、抗氧化、抗腫瘤、降血脂等多種生物學活性。因此，研究滸苔多糖的提取工藝，對于有效利用滸苔資源具有重要的意義。目前，從滸苔中提取多糖的常用方法是溶液提取法、酶輔助提取法和物理輔助提取法，物理輔助提取法主要是超聲波輔助提取法和微波輔助提取法。但上述方法或成本過高，或步驟繁瑣復雜，不適合工業化生產。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種滸苔堿溶性多糖的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：

本發明提供的滸苔堿溶性多糖的制備方法，包括下列步驟：

a. 將新鮮的滸苔用清水洗滌，除去泥沙，45℃烘干，干燥后的樣品經粉碎機粉碎，過40目篩。

b.滸苔干燥粉末與10倍體積的80%乙醇溶液混合后，60℃超聲處理1h，反應結束后過濾，烘干。

c. 采用50倍體積的水熱回流，90℃反應2小時，收集殘渣，并用熱水洗滌3次。

d. 酶解：將得到的殘渣以重量比1:40的料液比加入復合酶液，調節pH8.0在55℃下反應80min。

e. 浸提：酶解反應結束后，5000rpm下離心10min,得到沉淀；將沉淀與10倍體積的0.02M NaOH溶液混合，水浴80℃，提取40min，5000rpm離心10min，收集上清液，對沉淀重復提取2次，并合并3次上清液。

f. 濃縮純沉：將得到的上清液在50℃下減壓濃縮蒸餾至1/4體積，調節pH至7，加入3倍體積的95%的乙醇溶液，邊加邊攪拌，放置4h后，5000rpm離心10min，收集沉淀。

g. 洗滌：將沉淀用95%的乙醇洗滌后，得到滸苔堿溶性粗多糖。

h. 純化：將得到的堿溶性粗多糖加入4倍 0.02M NaOH溶液溶解；用sevag法除蛋白；調pH至8，在50℃下滴加入10%的H₂O₂脫色10min；加入3倍體積95%乙醇，離心，收集沉淀3次，冷凍干燥得到滸苔堿溶性多糖。

本發明用的復合酶包括纖維素酶和中性蛋白酶，兩者的重量比例是0.5-3：1。進一步優化的結果是纖維素酶和中性蛋白酶，兩者的重量比例是1：1。

本發明的有益效果：