[發(fā)明專利]一種膠體金法半定量檢測人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體CD71檢測試劑盒

在審

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• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN108614112A
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李翀;趙文博;楊昭;康星;張旭;朱學(xué)加;王建華
• 申請（專利權(quán)）人: 北京邁迪金生物科技股份有限公司;北京中達健科生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 北京知呱呱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11577
• 代理人: 李芙蓉;孫進華

本發(fā)明公開了一種膠體金法半定量檢測人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體CD71檢測試劑盒，其包括：底板、吸水紙、NC膜、結(jié)合墊以及樣品墊，所述NC膜位于所述底板上，所述結(jié)合墊的一部分貼合于所述NC膜的一端，所述樣品墊位于所述結(jié)合墊上部，所述吸水紙一部分與所述NC膜的另一端貼合，所述結(jié)合墊上包被有膠體金標記的CD71單克隆抗體，所述NC膜上分別設(shè)有檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線上包被有ABC71單克隆抗體，所述質(zhì)控線上包被有羊抗鼠IgG。本發(fā)明采用雙抗夾心側(cè)向?qū)游龇ǎㄟ^針對人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的ABC71單克隆抗體作為捕獲抗體，以膠體金為標記載體，實現(xiàn)了簡單、快速、精準地半定量檢測人體液中轉(zhuǎn)鐵蛋白受體含量的目的。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫層析法生物技術(shù)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種膠體金法半定量檢測人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體CD71檢測試劑盒。

背景技術(shù)

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)是細胞膜轉(zhuǎn)運蛋白，廣泛地存在于人的多種細胞胞膜上，如胎盤絨毛滋養(yǎng)層合體細胞、合成Hb的幼紅細胞以及活躍的腫瘤細胞等。TfR分為2種亞型，即TfR1和TfR2。TfR1是一種介導(dǎo)細胞內(nèi)鐵攝取并能調(diào)節(jié)細胞生長相關(guān)的II型跨膜蛋白，由完全相同的2條單體通過第89和92位上的胱氨酸殘基形成的兩條二硫鍵連接而成。每條單體含780個氨基酸殘基，分子量90kD，分為3個區(qū)域，N端的61個氨基酸殘基處于細胞內(nèi)，C端的671個氨基酸殘基處于細胞外，中間的28個氨基酸氨基為跨膜區(qū)。其C端區(qū)域為外功能區(qū)，包含3個N糖基化位點和1個O糖基化位點，同TF介導(dǎo)的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運是細胞獲得鐵元素的重要方式。

TfR2則主要表達于肝臟，N端的80個氨基酸組成胞內(nèi)區(qū)，24個氨基酸組成跨膜區(qū)，C端的696個氨基酸殘基組成胞外區(qū)。其胞外區(qū)與TfR1氨基酸序列45％一致，66％同源。

實際測定的是人體液中的可溶性TfR，即sTfR。sTfR分子量75kD，是由TfR1胞外區(qū)的100-101氨基酸之間的肽鍵斷裂形成，胞外分泌后與Tf結(jié)合，與TfR1保持一定比例，主要分布于人的血液中，分泌物(如唾液)及排泄物中(如尿液、糞便)也含有少量。

可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體sTfR目前主要用于人缺鐵性疾病的判斷，其含量的多少直接反映了人體內(nèi)鐵含量的缺乏或過剩，對于區(qū)分貧血病人是缺鐵性貧血或其他慢性疾病引起的貧血以及人體內(nèi)紅細胞生成的評價有一定參考意義。

并且，癌細胞的生成經(jīng)常伴隨著TfR大量的表達，因此sTfR的含量檢測能為某些癌癥的早期診斷提供輔助依據(jù)。目前經(jīng)臨床研究，鼻咽癌、肝癌、血液系統(tǒng)腫瘤以及乳腺癌、胃癌、膀胱癌等大多數(shù)惡性腫瘤病人都伴隨有TfR的大量表達，其含量直接預(yù)示了腫瘤細胞的增殖活性。由于轉(zhuǎn)鐵蛋白受體與腫瘤細胞存在密切關(guān)系，目前其用于癌癥的輔助診斷和作為載體用于癌癥的治療成為研究熱點。

目前市面上用來測定sTfR含量的試劑盒不在少數(shù)，但一般局限在酶聯(lián)免疫吸附法、免疫比濁法等。酶聯(lián)免疫法雖有較好的線性和靈敏度，但操作過程煩瑣，整個檢測過程至少需要4小時以上的時間，對檢測樣品數(shù)量也有最低要求；免疫比濁法則對抗原與標記物形成的分子量及數(shù)量有一定的要求，否則比較難以測定。

由此可見，傳統(tǒng)的檢測方法檢測時間長，操作過程復(fù)雜，檢測的準確度低，亟待進一步改進。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種膠體金法半定量檢測人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體CD71檢測試劑盒，用以解決現(xiàn)有檢測試劑盒操作時間長，操作過程復(fù)雜，檢測準確度低的缺陷。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種膠體金法半定量檢測人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體CD71檢測試劑盒，其包括：底板、吸水紙、NC膜、結(jié)合墊以及樣品墊，所述NC膜位于所述底板上，所述結(jié)合墊的一部分貼合于所述NC膜的一端，所述樣品墊位于所述結(jié)合墊上部，所述吸水紙一部分與所述NC膜的另一端貼合，所述結(jié)合墊上包被有膠體金標記的CD71單克隆抗體，所述NC膜上分別設(shè)有檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線上包被有ABC71單克隆抗體，所述質(zhì)控線上包被有羊抗鼠IgG。