[發明專利]一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體

在審

• 申請號: 201810503466.1
• 申請日: 2018-05-23
• 公開（公告）號: CN108753788A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 張慧;姜侃;陳小珍;張東雷
• 申請（專利權）人: 浙江省產品質量安全檢測研究院
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;G01N33/533;G01N33/532
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 劉曉春

本發明屬于生物檢測技術領域，尤其是涉及一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體。本發明通過指數富集的配體系統進化技術，利用磁珠法進行己烯雌酚結合篩選，然后經PCR擴增結合的核苷酸序列經過多輪富集篩選，獲得了高親和力且特異識別己烯雌酚的核酸適配體；本發明所提供的核酸適配體可由商業公司合成獲得，可以進行人工合成和標記，成本較低；本發明所提供的核酸適配體能夠與己烯雌酚特異性結合，可以建立食品或環境中己烯雌酚的快速檢測方法，應用前景廣闊。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，尤其是涉及一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體。

背景技術

己烯雌酚作為與食品安全風險密切相關的一種環境激素，具有類似雌性激素的作用，即使數量極少，也可能導致動物和人體行為異常、生殖能力下降、性早熟等疾病。由于己烯雌酚能夠促進動物生長、增加廋肉率，常被非法用于動物的飼養而引起藥物在動物內臟、肌肉、甚至蛋、奶中的殘留，引發食品安全隱患。

己烯雌酚的測定方法主要有高效液相色譜-串聯質譜法、高效液相色譜法和酶聯免疫法等。前兩種方法具有高的靈敏度和準確性，但需要昂貴的精密儀器和訓練有素的專業技術人員，檢測成本較高，適合大型實驗室的確證檢測；酶聯免疫法操作簡單，適合大量樣品檢測的快速篩查，但是生物抗體制備過程繁瑣耗時、成本昂貴。

核酸適配體是通過指數富集的配體進化技術（Systematic Evolution ofLigands by Exponential Enrichment，SELEX）得到的一組能與靶分子如蛋白質、有機物或金屬離子等高親和、高特異性結合的寡核苷酸序列（DNA或RNA）。核酸適配體的篩選在體外完成篩選，不依賴動物或細胞，得到的序列可通過聚合酶鏈反應（PCR）技術大量合成；同時適配體化學穩定性好，易于修飾。因此，核酸適配體常被研究者用于藥物殘留、真菌毒素等領域的便攜、低成本檢測技術的開發。

發明內容

本發明的目的在于，針對現有技術中存在的不足，提供一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體。

為此，本發明的上述目的通過以下技術方案來實現：

一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體，所述特異識別己烯雌酚的核酸適配體包括核苷酸序列為：GAAGGATGGATGCTTTGGTGTGTAGTATGAGCGAGCGTTGCGA的核酸適配體。

為了取得進一步的技術效果，本發明還可以采用以下進一步的技術方案：

優選地，核苷酸序列為：

GAAGGATGGATGCTTTGGTGTGTAGTATGAGCGAGCGTTGCGA的核酸適配體的兩端可以用修飾材料進行修飾，修飾材料包括氨基、生物素、納米物質或熒光物質。

本發明提供一種特異識別己烯雌酚的核酸適配體，具有如下有益效果：

（1）本發明通過指數富集的配體系統進化技術，利用磁珠法進行己烯雌酚結合篩選，然后經PCR擴增結合的核苷酸序列經過多輪富集篩選，獲得了高親和力且特異識別己烯雌酚的核酸適配體；

（2）本發明所提供的核酸適配體可由商業公司合成獲得，可以進行人工合成和標記，成本較低；

（3）本發明所提供的核酸適配體能夠與己烯雌酚特異性結合，可以建立食品或環境中己烯雌酚的快速檢測方法，應用前景廣闊。

附圖說明

圖1為本發明所提供的特異識別己烯雌酚的核酸適配體的空間結構預測圖；

圖2為本發明所提供的特異識別己烯雌酚的核酸適配體的特異性試驗結果圖。

具體實施方式

參照附圖和具體實施例對本發明作進一步詳細地描述。