[發(fā)明專利]一種高效制備O-GlcNAc修飾蛋白的大腸桿菌表達體系有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810499019.3 | 申請日： | 2018-05-23 |
| 公開（公告）號： | CN110527691B | 公開（公告）日： | 2022-02-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 顧玉超;高紅;于文功 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國海洋大學 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 266100 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 高效 制備 glcnac 修飾 蛋白 大腸桿菌 表達 體系 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種重組質(zhì)粒，其特征在于，所述重組質(zhì)粒的構(gòu)建方法包括：
選擇氯霉素抗性的細菌人工染色體pBAC質(zhì)粒載體；
使用pBAC質(zhì)粒同時表達OGT、GlmU及GlmM，每一個基因都有獨立的啟動子和終止子，構(gòu)建得到pBAC-OGT-GlmU-GlmM重組質(zhì)粒，所述重組質(zhì)粒中OGT帶有MBP標簽。
2.一種大腸桿菌表達體系，其特征在于，由權(quán)利要求1所述的重組質(zhì)粒與底物蛋白質(zhì)粒共轉(zhuǎn)到大腸桿菌BL21得到。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大腸桿菌表達體系在改變底物蛋白O-GlcNAc修飾上的應用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于，所述應用為提高多種底物蛋白O-GlcNAc修飾水平，所述底物蛋白包括但不限于H2B、P53和TAB1。
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