[發(fā)明專(zhuān)利]AKAP3蛋白203位S+79.967在制備重度少弱精診斷試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810489113.0
• 申請(qǐng)日: 2018-05-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110514837B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊靜華;趙涵;王風(fēng)芹;陳子江
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/68;A61K45/00;A61P15/08
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發(fā)明公開(kāi)了AKAP3蛋白203位發(fā)生+79.967±0.005質(zhì)量偏移的絲氨酸作為生物標(biāo)志物在制備重度少弱精的診斷試劑中的用途。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)：通過(guò)AKAP3蛋白203位發(fā)生+79.967±0.005質(zhì)量偏移的絲氨酸的檢驗(yàn)頻次可以用來(lái)診斷重度少弱精癥，為重度少弱精癥提供了新的診斷和治療靶點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)和分子診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種AKAP3蛋白203位發(fā)生+79.967±0.005質(zhì)量偏移的絲氨酸(非編碼氨基酸AKAP3@203S+79.967)作為標(biāo)志物在制備重度少弱精診斷試劑中的用途。

背景技術(shù)

據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查，15％的育齡夫婦存在不育問(wèn)題，不育癥已成為影響人類(lèi)健康與社會(huì)發(fā)展的一個(gè)全球性醫(yī)學(xué)和社會(huì)問(wèn)題(Turner,T.T.and J.J.Lysiak,Oxidativestress:a commonfactor in testicular dysfunction.J Androl,2008.29(5):p.488-98)。如果a級(jí)精子數(shù)25％，(a+b)級(jí)精子數(shù)50％，且精子活率低于60％的話(huà)就可診斷為弱精子癥。少精子癥是指精液中的精子數(shù)目低于正常具有生育能力男性的一種病癥，當(dāng)男性的精子在每毫升低于2千萬(wàn)時(shí)，就為少精子癥。雖然現(xiàn)今關(guān)于少弱精子癥的發(fā)病機(jī)制的研究很多，但是其確切機(jī)制尚不明朗，這也阻礙了其新的治療手段的發(fā)展。由于精子成熟后其轉(zhuǎn)錄和翻譯處于停滯狀態(tài)，這就為研究人員在蛋白質(zhì)組及其翻譯后修飾水平上研究少弱精子癥的生理病理機(jī)制提供了方便。

目前關(guān)于精子蛋白質(zhì)組的研究有很多，總共大約鑒定了6238個(gè)非冗余蛋白(Semenproteomics and male infertility，Meritxell Jodar,Ada Soler-Ventura,RafaelOliva，Molecular Biology of Reproductionand Development ResearchGroup，JournalofProteomics 162(2017)125–134)。目前最新更新的人類(lèi)精子蛋白質(zhì)組Amaral等完成，共鑒定了6198個(gè)蛋白(Amaral A,Castillo J,Ramalho-Santos J,Oliva R.Thecombined humanspermproteome:cellular pathways and implications for basic andclinical science.Human reproduction update,20(1),40-62(2014))。Mayank等利用差異蛋白質(zhì)組學(xué)的方法在5組健康人和8組少弱精子癥患者的精子細(xì)胞中定量了667個(gè)蛋白，精漿中定量了447個(gè)蛋白，分許出了8個(gè)顯著下調(diào)蛋白，并對(duì)其進(jìn)行了通路分析(HumanSpermatozoa Quantitative Proteomic Signature Classifies Normo-andAsthenozoospermia，Mayank Saraswat,Sakari Joenvaara,Tushar Jain,Anil KumarTomar,Ashima Sinha,Sarman Singh,Savita Yadav,and Risto Renkonen，Mol CellProteomics.2017Jan；16(1):57-72)。為了研究無(wú)精癥的分子機(jī)制，Mehdi等利用非標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法在人阻塞性和非阻塞性無(wú)精癥的睪丸組織中找到了520個(gè)顯著性變化蛋白，包括幾種關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，這也為研究精子發(fā)生和人類(lèi)生殖的分子調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)(Quantitative proteomic analysis of human testis reveals system-widemolecular and cellular pathways associated withnon-obstructive azoospermia，MehdiAlikhani，MehdiMirzaei，MarjanSabbaghian，PouriaParsamatin，RaziehKaramzadeh，SamaneAdib，NiloofarSodeifi，Mohammad Ali SadighiGilani，MasoudZabet-Moghaddam，LindsayParker，YunqiWu，VivekGupta，PaulA.Haynes，HamidGourabi，HosseinBaharvand，GhasemHosseiniSalekdeh，Journal ofProteomics，Volume 162,6June 2017,Pages 141-154)。成熟精子翻譯轉(zhuǎn)錄活動(dòng)的沉默也使其成為研究翻譯后修飾的理想細(xì)胞模型，但是關(guān)于基于質(zhì)譜的精子翻譯后修飾大規(guī)模研究還是很少。關(guān)于修飾的研究主要集中于磷酸化，糖基化，乙酰化和泛素化(The Challenge ofHumanSpermatozoa Proteome:A Systematic Review，Kambiz Gilany,Arash Minai-Tehrani,MehdiAmini,Niloofar Agharezaee,Babak Arjmand，J Reprod Infertil.2017Jul-Sep；18(3):267–279.)。絡(luò)氨酸磷酸化對(duì)于精子的運(yùn)動(dòng)、獲能、超激運(yùn)動(dòng)等過(guò)程重要作用。Chying-ChyuanChan等通過(guò)對(duì)20組正常人和弱精癥患者的精子進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)有12種包括TUBGCP2在內(nèi)的蛋白發(fā)生了過(guò)磷酸化。非編碼氨基酸包括翻譯后修飾和氨基酸突變是調(diào)控蛋白功能和結(jié)構(gòu)的重要方式，因此將疾病狀態(tài)下異常的或者數(shù)量變化極大的非編碼氨基酸作為疾病的生物標(biāo)志物進(jìn)而用于診斷疾病的進(jìn)程具有重要意義。