[發明專利]一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物及其制備方法

在審

• 申請號: 201810472947.0
• 申請日: 2018-05-17
• 公開（公告）號: CN108704164A
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 朱君;鄧志宏;趙宇
• 申請（專利權）人: 廣東芙金干細胞再生醫學有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/38;A61L27/50
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明實施例提供一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物及其制備方法，涉及醫學整形和美容領域，注射用細胞輔助自體脂肪移植物能夠提高自體脂肪移植成活率，顯著改善脂肪移植后效果。所述注射用細胞輔助自體脂肪移植物包括自體脂肪顆粒、間充質干細胞聚集體和自體富含血小板血漿PRP。

技術領域

本發明涉及醫學整形和美容領域，尤其涉及一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物及其制備方法。

背景技術

軟組織移植物利用占位效應支撐組織結構，起到修復軟組織缺失、祛除凹陷的作用，還可為胸部或臀部增加容積，達到重塑外形的目的。良好的軟組織移植物需要具有以下特征：（1）組織相容性好，不引起炎癥反應；（2）能夠與填充部位整合；（3）填充效果持久可靠。

自體脂肪作為軟組織移植物最早應用于1893年， Neuber使用患者自體脂肪填充凹陷性面部缺陷。自體脂肪與膠原蛋白、透明質酸、PMMA、聚丙烯酰胺等凝膠類軟組織填充劑相比優勢明顯：可通過抽脂術獲得，經離心去除腫脹液后即可填充至修復部位，無需純化、交聯、滅菌等工藝過程，步驟簡單，安全可靠。但是，自體脂肪填充血供重建困難，中心部位易發生壞死、液化，最終纖維化且被吸收，制約了該技術的臨床應用。

為了改善移植效果，人們開始嘗試向脂肪組織中加入成纖維細胞、血管基質片段（SVF）或干細胞，期望細胞能夠參與新生血管生成，有助于移植脂肪組織早期血供的建立，從而提高移植物成活率，稱之為“細胞輔助自體脂肪移植”（cell assistedliportransfer, CAL）。專利CN 102205147 A公開了一種包含SVF和PRF的脂肪移植物，就是利用SVF的細胞混合物特征以及PRF包含的多種生長因子促進軟組織再生。文獻中也有將CAL應用于臨床治療的報道。然而，大樣本比較發現CAL的移植效果并不明顯優于傳統的自體脂肪移植方法。分析原因：在脂肪移植物構建過程中，天然脂肪組織結構受到破壞，缺少支撐，使添加的細胞被脂肪顆粒包裹其中，難以參與血供重建，最終導致移植物中心壞死，移植失敗。

發明內容

本發明實施例提供了一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物及其制備方法，注射用細胞輔助自體脂肪移植物能夠提高自體脂肪移植成活率，顯著改善脂肪移植后效果。

為達到上述目的，本發明實施例采用如下技術方案：

本發明實施例提供一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物，所述注射用細胞輔助自體脂肪移植物包括自體脂肪顆粒、間充質干細胞聚集體和自體富含血小板血漿PRP。

進一步地，所述間充質干細胞聚集體具有力學強度。

進一步地，所述間充質干細胞聚集體中至少包括膠原。

進一步地，所述自體富含血小板血漿PRP中至少包括轉化生長因子β-1(TGFβ-1)、血小板源性生長因子 (PDGFs)和胰島素樣生長因子(IGFs)。

進一步地，所述自體富含血小板血漿PRP具有纖維蛋白支架作用和緩釋作用。

本發明實施例還提供一種注射用細胞輔助自體脂肪移植物的制備方法，所述注射用細胞輔助自體脂肪移植物的制備方法至少包括如下步驟：

步驟一：自體脂肪顆粒的純化

處理抽脂獲得的脂肪組織，得到固態的脂肪顆粒；再將得到的脂肪顆粒去除結締組織，用組織剪將大塊組織剪碎，以1 ml注射器去除針頭后能正常抽取為宜；

步驟二：間充質干細胞聚集體制備

將間充質干細胞接種在一次性培養皿中，于37℃，5 % CO₂條件下進行細胞膜片培養；使用DMEM高糖培養基培養7~10天后，細胞膜片形成；將細胞膜片從邊緣揭起，在無菌環境下分割成邊長1~1.5 mm的間充質干細胞聚集體，備用；

步驟三：自體富含血小板血漿PRP分離