[發明專利]一種抱子甘藍的組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201810445577.1
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108719062A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發明（設計）人: 王澤清;王繼華;邵振芳
• 申請（專利權）人: 廣州禾立田生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明根據抱子甘藍的生長特性，在MS培養基的基礎上配置出適合抱子甘藍組織培養的用于不定芽誘導的培養基、用于繼代增殖的培養基和用于無菌生根的培養基。使用本發明所述的用于不定芽誘導的培養基、用于繼代增殖的培養基和用于無菌生根的培養基能有效提高繁殖系數，降低生產成本；生產周期短，種植效益大大提高；也為抱子甘藍的分子育種提供技術支撐。

技術領域

本發明涉及一種抱子甘藍的組織培養快速繁殖方法，屬于植物快速繁殖技術領域。

背景技術

抱子甘藍也稱芽甘藍和子持甘藍，原產于地中海沿岸，屬于十字花科蕓薹屬甘藍種二年生草本植物，是歐洲和北美洲國家的重要蔬菜之一。抱子甘藍是甘藍種的變種，因其中腋芽能形成小葉球可供食用而得名。抱子甘藍的風味似結球甘藍卻也具有自身獨特的口味，小葉球營養價值很高，其蛋白質的含量居甘藍類蔬菜之首，而且富含維生素C、硒、胡蘿卜素、維生素B1和維生素B2，其中蛋白含量在甘藍類蔬菜中是最高的。20世紀末抱子甘藍引進到我國并開始種植，使之成為時興的蔬菜。雖然引入時間不長，但是得到市場的認可，非常流行，市場上往往供不應求。在我國市場主要有2種抱子甘藍，一種是紫色，另外一種是綠色。

甘藍的研究較多，已經成功建立了組織培養技術體系。但是目前抱子甘藍相關的研究較少，十分薄弱。抱子甘藍的組織培養技術還沒有報道，也沒有進行抱子甘藍工廠化生產。組織培養技術能夠在短期內大量提供抱子甘藍的種苗，進行優良種苗的快速繁殖。

孢子甘藍屬于雜交種，育種周期長，后代性狀容易分離，優良性狀的固定和組織培養相比十分困難，通過組織培養無性繁殖可以對雜交后代選育的優良株系的性狀進行快速固定。

針對以上的現狀，本發明提供了一種抱子甘藍的組織培養快速繁殖方法，可以快速繁殖優良種苗，提高種植和銷售者的收入，促進抱子甘藍產業的發展。

發明內容

本發明的目的在于解決當前抱子甘藍種苗研究薄弱，為快速繁殖抱子甘藍種苗，提供一種快速，低成本，高效的組織培養快速繁殖方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方法如下：

一種抱子甘藍的組織培養快速繁殖方法，包括以下步驟：(1)外植體選取與消毒，(2)培養基的制備，(3)不定芽誘導，(4)繼代增殖，(5)無菌生根以及(6)煉苗與移栽。該方法的具體步驟如下：

(1)外植體選取與消毒：

①選取生長健康的抱子甘藍幼嫩的枝條作為外植體；

②用中性洗滌劑洗滌洗枝條，以去除枝條表面的污垢，然后去除多余的葉片，干凈紙巾吸干表面水分；

③在超凈工作臺上，先用70％酒精浸泡10-30s，再用無菌水沖洗3次，每次3-5min；

④立即轉入0.1-0.3％的升汞溶液中消毒5-8min，最后用無菌水洗滌3-5次，每次3-5min，得到消毒外植體。

(2)培養基的制備：

①改良MS培養基的制備，配方為：用Ca(NO3)2·4H2O代替原MS培養基中的CaCl2·2H2O并添加核黃素，其他組分均無變化；在改良MS培養基中Ca(NO3)2·4H2O的濃度為50-100mg/L，核黃素的濃度為0.3-5mg/L；

②制備用于不定芽誘導的培養基，配方為：在所述改良MS培養基上添加6-BA、KT以及IAA；在不定芽誘導培養基中6-BA的濃度為0.5-0.8mg/L，KT的濃度為0.5-1mg/L，IAA的濃度為0.05-0.5mg/L；

③制備用于繼代增殖的培養基，配方為：在所述改良MS培養基的基礎上添加6-BA、KT以及IAA，在繼代增殖培養基中6-BA的濃度為0.5-2mg/L，KT的濃度為0.1-2mg/L，IAA的濃度為0.05-5mg/L；