[發明專利]一種高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠及其制備方法

在審

• 申請號: 201810433719.2
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108627564A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 汪洋;謝慧慧
• 申請（專利權）人: 蘇州勇泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447;G01N1/40;G01N33/68
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 閔東

1.一種高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠，其特征在于：由分離膠和濃縮膠組合而成；

所述分離膠中包含的組分有丙烯酰胺、雙甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH穩定劑HEPES、十二烷基硫酸鈉、牛磺酸、超純水、Tris-HCl溶液、過硫酸銨溶液和四甲基乙二胺；

所述濃縮膠中所包含的組分有丙烯酰胺、雙甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH穩定劑HEPES、十二烷基硫酸鈉、牛磺酸、超純水、Tris-HCl溶液、過硫酸銨溶液和四甲基乙二胺。

2.根據權利要求1所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠，其特征在于：所述分離膠中，丙烯酰胺的質量為80-120g，雙甲叉丙烯酰胺的質量為2.4-3.6g，甘氨酸的質量為25g，pH穩定劑HEPES的質量為5g，十二烷基硫酸鈉的質量為0.5g，牛磺酸的質量為10g，超純水的的體積為600mL，Tris-HCl溶液的體積為100mL，過硫酸銨溶液的體積為10mL，四甲基乙二胺0.5mL。

3.根據權利要求1所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠，其特征在于：所述濃縮膠中，丙烯酰胺的質量為50g，雙甲叉丙烯酰胺的質量為1.5g，甘氨酸的質量為25g，pH穩定劑HEPES的質量為5g，十二烷基硫酸鈉的質量為0.5g，牛磺酸的質量為10g，超純水的的體積為600mL，Tris-HCl溶液的體積為100mL，過硫酸銨溶液的體積為10mL，四甲基乙二胺0.5mL。

4.根據權利要求2或3所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠，其特征在于：所述分離膠和所述濃縮膠中的Tris-HCl溶液均為1M pH6.5的Tris-HCl溶液。

5.根據權利要求2或3所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠，其特征在于：所述分離膠和所述濃縮膠中的過硫酸銨溶液均為10%的過硫酸銨溶液。

6.一種高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1）稱取一定量的丙烯酰胺、雙甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH穩定劑HEPES、十二烷基硫酸鈉、牛磺酸，置于1000ml燒杯中；

步驟2）向上一步驟的燒杯中加入一定量的超純水，充分攪拌混勻，形成混合溶液；

步驟3）在上一步驟得到混合溶液中，加入一定量的Tris-HCl溶液、過硫酸銨溶液和四甲基乙二胺，充分攪拌混勻，配置成分離膠溶液；

步驟4）將上一步驟得到分離膠溶液加入到1.0mm的垂直制膠玻璃板中，加入適量的超純水進行壓線，靜置一定時間待其凝固，形成分離膠；

步驟5）再次稱取一定量的丙烯酰胺、雙甲叉丙烯酰胺、甘氨酸、pH穩定劑HEPES、十二烷基硫酸鈉、牛磺酸，置于另一個1000ml燒杯中；

步驟6）向上一步驟的燒杯中加入一定量的超純水，充分攪拌混勻，形成混合溶液；

步驟7）在上一步驟得到混合溶液中，加入一定量的Tris-HCl溶液、過硫酸銨溶液和四甲基乙二胺，充分攪拌混勻，配置成濃縮膠溶液；

步驟8）去除分離膠上方壓線的超純水，并用吸水紙吸干殘留的液體，加入上一步驟剛配好的濃縮膠溶液，然后插入梳子，靜置一定時間等待凝膠，制成聚丙烯酰胺凝膠。

7.根據權利要求6所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠的制備方法，其特征在于：步驟1）中，稱取80-120g丙烯酰胺，2.4-3.6g雙甲叉丙烯酰胺，25g甘氨酸，5gpH穩定劑HEPES，0.5g十二烷基硫酸鈉，10g牛磺酸。

8.根據權利要求6所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠的制備方法，其特征在于：步驟2）和步驟6）中，均加入600mL的超純水。

9.根據權利要求6所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠的制備方法，其特征在于：步驟3）和步驟7）中，均加入的100ml的1M pH6.5 Tris-HCl溶液、10ml 10%的過硫酸銨溶液和1ml的四甲基乙二胺。

10.根據權利要求6所述的高效穩定的聚丙烯酰胺凝膠的制備方法，其特征在于：所述步驟4）和步驟8）中，凝膠靜置時間均為20-30分鐘。