[發(fā)明專利]耐高溫耐鹽的餐廚垃圾腐熟復(fù)合菌劑的制備方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810424999.0 | 申請日： | 2018-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN108587967B | 公開（公告）日： | 2020-06-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李光超;羅小艷;王道勝 | 申請（專利權(quán)）人： | 黃山中科新佳生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N1/18;C12N9/20;C12N9/26;C12N9/42;C12N9/50;B09B3/00;C12R1/465;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/865 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 245900 安*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 耐高溫 垃圾 腐熟 復(fù)合 制備 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
選用以下4種菌：鏈霉菌、枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌及釀酒酵母菌；
所述鏈霉菌保藏號為CGMCC No.15321、枯草芽孢桿菌保藏號為CGMCC No.15322、解淀粉芽孢桿菌保藏號為CGMCC No.15323；
依次進(jìn)行以下步驟：
①、種子菌液培養(yǎng)：
將上述4種菌分別進(jìn)行種子培養(yǎng)，從而分別對應(yīng)的得到鏈霉菌菌絲球懸液、枯草芽孢桿菌菌液、解淀粉芽孢桿菌菌液和釀酒酵母菌菌液；
②、固體腐熟菌制備：
將鏈霉菌菌絲球懸液，按1ml/9～11g的接種量接種至固體發(fā)酵料中，于35～40℃下培養(yǎng)7～10天，獲得固體腐熟菌；
③、復(fù)合菌液制備：
將步驟①所得的枯草芽孢桿菌菌液、解淀粉芽孢桿菌菌液及釀酒酵母菌菌液按體積比為3～6:3～6:1～2混合，獲得復(fù)合菌液；
④、酶制劑制備：酶制劑包含纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶；
將酶活力為10000U/g的纖維素酶、10000U/g蛋白酶、18000U/g淀粉酶和10000U/g脂肪酶粉劑按重量比1～4:1～4:1～4:1～2混合均勻，獲得酶制劑；
⑤、腐熟復(fù)合菌劑制備：
將步驟③所得復(fù)合菌液與步驟②所得固體腐熟菌按9～11ml/100g的比例攪拌混勻、再進(jìn)行低溫烘干，最后按重量比0.2％混入酶制劑，獲得腐熟復(fù)合菌劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
所鏈霉菌菌絲球懸液的制備方法為：
將鏈霉菌接種至高氏1號液體培養(yǎng)基中，于35～40℃、100～200rpm培養(yǎng)2～5天，得到鏈霉菌一級種子液；再將鏈霉菌一級種子液按照4.5～5.5％的體積接種量轉(zhuǎn)接至高氏1號液體培養(yǎng)基中，于50～55℃下、100～200rpm培養(yǎng)2～5天，得到鏈霉菌菌絲球懸液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
所述枯草芽孢桿菌的制備方法為：
將枯草芽孢桿菌接種至改良NA液體培養(yǎng)基中，于35～40℃、100～200rpm培養(yǎng)24～48小時，得到枯草芽孢桿菌一級種子液，再將枯草芽孢桿菌一級種子液按照4.5～5.5％的體積接種量轉(zhuǎn)接至改良NA液體培養(yǎng)基中，于50～55℃、100～200rpm培養(yǎng)24～48小時，得到枯草芽孢桿菌菌液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
所述解淀粉芽孢桿菌菌液制備方法為：
將解淀粉芽孢桿菌接種至LB液體培養(yǎng)基中，于35～40℃、100～200rpm培養(yǎng)24～48小時，得到解淀粉芽孢桿菌一級種子液；再將解淀粉芽孢桿菌一級種子液按照4.5～5.5％的體積接種量轉(zhuǎn)接至LB液體培養(yǎng)基中，于50～55℃、100～200rpm培養(yǎng)24～48小時，得到解淀粉芽孢桿菌菌液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
所述釀酒酵母菌菌液制備方法為：
將釀酒酵母菌接種至YPD液體培養(yǎng)基中，于35～40℃、100～200rpm培養(yǎng)12～36小時，得到釀酒酵母菌一級種子液，再將釀酒酵母菌一級種子液按照4.5～5.5％的體積接種量轉(zhuǎn)接至YPD液體培養(yǎng)基中，于35～40℃、100～200rpm培養(yǎng)12～36小時，得到釀酒酵母菌菌液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一所述的耐高溫耐鹽的餐廚腐熟復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于：
所述步驟②中固體發(fā)酵料的制備方法為：先將燕麥：米仁糠：麩皮＝3～6：1～3：1～4的重量比混合，然后調(diào)節(jié)所得混合物的水分含量為28～32％，滅菌，得固體發(fā)酵料；
培養(yǎng)期的第4天起至培養(yǎng)期結(jié)束，加水?dāng)嚢鑿亩刂品磻?yīng)物料的水分含量為28～32％。
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