[發(fā)明專利]檸檬酸的提取制備工藝

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810414041.3
• 申請(qǐng)日: 2018-05-03
• 公開（公告）號(hào): CN108588134A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李航;董力青;王錚;唐永強(qiáng);王峰;汲廣習(xí)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 齊齊哈爾龍江阜豐生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P7/48
• 分類號(hào): C12P7/48;C07C51/42;C07C51/47;C07C51/43;C07C59/265;C12R1/685
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1.檸檬酸的提取制備工藝，其包括如下步驟：步驟1）制備發(fā)酵培養(yǎng)基，步驟2）活化黑曲霉種子液，步驟3）發(fā)酵產(chǎn)酸，步驟4）提取檸檬酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于，所述工藝包括如下步驟：

步驟1）制備發(fā)酵培養(yǎng)基：將玉米秸稈破碎，然后與玉米皮按照2:1的質(zhì)量比混合，粉碎至粒徑大于50目，然后添加到5-7倍重量的水中，邊攪拌邊升溫至80℃，保溫30min，然后添加磷酸二氫鉀1g/L、磷酸氫二鉀1g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、七水硫酸亞鐵0.01g/L、一水硫酸錳0.01g/L，121℃濕熱滅菌30min，冷卻，得到木霉培養(yǎng)液；將里氏木霉按照10%的接種量接入到木霉培養(yǎng)液，培養(yǎng)72-96h，培養(yǎng)時(shí)控制攪拌速度為100rpm，培養(yǎng)溫度為30-32℃，通過流加氨水控制培養(yǎng)酵過程的pH為4-5；培養(yǎng)完成后，進(jìn)行過濾除去菌體，往所得液體中添加甲醇以及氫氧化鈣，攪拌均勻，即得發(fā)酵培養(yǎng)基；

步驟2）活化黑曲霉種子液：將黑曲霉按照常規(guī)培養(yǎng)24h獲得黑曲霉種子液，然后將種子液進(jìn)行超聲處理；

步驟3）發(fā)酵產(chǎn)酸：將步驟2）所得黑曲霉種子液按照8-10%的接種量接入到含有步驟1）所得發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵過程中通過流加氨水控制在pH在4-4.5，發(fā)酵時(shí)間為60h；

步驟4）提取檸檬酸：將發(fā)酵液用高速碟片分離機(jī)進(jìn)行離心，分離得到檸檬酸料液和菌體蛋白沉淀；將檸檬酸料液濃縮成原體積三分之一到四分之一的濃縮液，然后經(jīng)過超濾膜超濾，收集濾過液，然后進(jìn)入結(jié)晶罐進(jìn)行結(jié)晶處理；將結(jié)晶料液進(jìn)行離心收集固相；將固相用溫水進(jìn)行溶解，然后經(jīng)過離子交換、濃縮、離心、烘干得到檸檬酸產(chǎn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于，所述步驟1）中，甲醇的添加量為0.2%，體積比，氫氧化鈣的添加量為10wt%。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于，所述超聲處理參數(shù)為：超聲頻率30KHz，功率6W，超聲間隔15s，超聲時(shí)間1s，總超聲時(shí)間為160s。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于，所述步驟3）中，發(fā)酵參數(shù)為：發(fā)酵溫度為34-36℃，罐壓為0.03-0.04MPa，風(fēng)量為500-600L/h。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于，所述步驟4）中，高速碟片機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000-4500rpm，離心時(shí)間為3min。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的工藝，其特征在于，所述步驟4）中，超濾膜截留分子量為300Da，超濾溫度為35℃。