[發明專利]頭頸部鱗癌標志物引物組合、檢測試劑盒及其定量檢測方法在審
| 申請號: | 201810392823.1 | 申請日: | 2018-04-27 |
| 公開(公告)號: | CN108570500A | 公開(公告)日: | 2018-09-25 |
| 發明(設計)人: | 劉超;張東升;龐法偉;崔言軍;柴利 | 申請(專利權)人: | 山東省立醫院 |
| 主分類號: | C12Q1/6886 | 分類號: | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京華進京聯知識產權代理有限公司 11606 | 代理人: | 王賽 |
| 地址: | 250000 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 定量檢測 頭頸部鱗癌 正向引物 標志物 引物組合 定量檢測試劑 標志物檢測 檢測試劑 試劑盒 檢測 | ||
1.一種用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,其特征在于,包括用于miR-10b定量檢測的正向引物、用于miR-31定量檢測的正向引物、用于miR-24定量檢測的正向引物中的至少一種。
2.根據權利要求1所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,其特征在于,所述引物組合包括用于miR-10b定量檢測的正向引物、所述用于miR-31定量檢測的正向引物、所述用于miR-24定量檢測的正向引物中的兩種或三種的組合。
3.根據權利要求1所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,其特征在于,所述用于miR-10b定量檢測的正向引物的序列如SEQ ID NO.1所示。
4.根據權利要求1所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,其特征在于,所述用于miR-31定量檢測的正向引物的序列如SEQ ID NO.2所示。
5.根據權利要求1所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,其特征在于,所述用于miR-24定量檢測的正向引物的序列如SEQ ID NO.3所示。
6.一種頭頸部鱗癌標志物檢測試劑盒,其特征在于,包括用于定量檢測miR-10b、miR-31、miR-24中的至少一種的定量檢測試劑。
7.根據權利要求6所述的頭頸部鱗癌標志物檢測試劑盒,其特征在于,所述定量檢測試劑包括如權利要求1至5任一項所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合。
8.根據權利要求7所述的頭頸部鱗癌標志物檢測試劑盒,其特征在于,所述定量檢測試劑還包括反向引物,所述反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示。
9.根據權利要求7所述的頭頸部鱗癌標志物檢測試劑盒,其特征在于,所述定量檢測試劑還包括PCR反應試劑,所述PCR反應試劑包括逆轉錄PCR反應試劑和實時定量PCR反應試劑。
10.一種頭頸部鱗癌標志物的定量檢測方法,包括以下步驟:
取預定量的待檢測樣品,提取總RNA;
將所述總RNA與逆轉錄PCR反應試劑混合,以所述總RNA為模板進行逆轉錄PCR反應,得到cDNA;
將根據權利要求1至5任一項所述的用于檢測頭頸部鱗癌標志物的引物組合,以及反向引物、所述cDNA和實時定量PCR反應試劑混合,以所述cDNA為模板進行定量PCR反應,定量擴增所述miR-10b、miR-31或miR-24;以及
對所述定量PCR反應的結果進行分析。
11.根據權利要求10所述的頭頸部鱗癌標志物的定量檢測方法,其特征在于,所述待檢測樣品為血清或者血漿。
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