[發(fā)明專利]一種小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810377970.1
• 申請(qǐng)日: 2018-04-25
• 公開（公告）號(hào): CN108680662A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董艷;董坤;肖靖秀;朱錦惠;張仕穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法包括：小麥蠶豆間作和蠶豆單作的土培及病原菌的接種；對(duì)根際土、根系分泌物的收集及病害調(diào)查；根系分泌物中糖、氨基酸和有機(jī)酸的測(cè)定；根系分泌物對(duì)枯萎病病原菌孢子萌發(fā)、菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響。

2.如權(quán)利要求1所述的小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟一具體包括：盆體大小為14×20cm，每盆裝土2.5kg；小麥蠶豆種植密度：?jiǎn)巫餍Q豆每盆留苗4株，小麥蠶豆間作蠶豆留苗2株，小麥留苗4株，在蠶豆五葉期接種蠶豆枯萎病病原菌，苗期管理不使用農(nóng)藥、殺菌劑和殺蟲劑。

3.如權(quán)利要求1所述的小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟二具體包括：

根際土浸提液采集方法：采用抖土法去除非根際土，用100ml蒸餾水提取根際土溶液，離心過濾，濾液過0.45μm濾膜，-20C冷凍保存、備用；

根系分泌物：分別取單作蠶豆和間作小麥蠶豆根系，用自來水反復(fù)清洗根部，再用蒸餾水清洗5次，用5mg/L百里酚浸泡3分鐘，在0.005mol.L^-1CaCl₂溶液中通氣收集根系分泌物2小時(shí)，收集液在40攝氏度條件小旋轉(zhuǎn)蒸干至10ml備用。

4.如權(quán)利要求1所述的小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟二中病害調(diào)查，記錄分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)、發(fā)病率及病情指數(shù)；

發(fā)病程度分為5級(jí)：0級(jí)：莖基部及根無病斑，表觀無癥狀；1級(jí)：莖基部或根的局部稍顯病斑或稍變色；2級(jí)：莖基部或主側(cè)根有病斑，但不連片：3級(jí)：1/3-1/2的莖基部或根部出現(xiàn)病斑、變色或腐爛，側(cè)根明顯減少；4級(jí)：莖基部被病斑環(huán)繞或根系大部分變色腐爛；5級(jí)：植株枯萎死亡。

5.如權(quán)利要求1所述的小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟二的發(fā)病率＝(發(fā)病株數(shù)/調(diào)查株總數(shù))×100；

病情指數(shù)＝∑(各級(jí)病株數(shù)×相應(yīng)級(jí)值)/(最高級(jí)值×調(diào)查總株數(shù))×100。

6.如權(quán)利要求1所述的小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟三根系分泌物中糖、氨基酸和有機(jī)酸的測(cè)定，測(cè)定時(shí)，從冰箱取出離心管解凍、過膜；總糖含量測(cè)定采用蒽酮比色法進(jìn)行，氨基酸分析采用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定；根分泌物有機(jī)酸組分及含量測(cè)定使用高效液相色譜儀，條件是250mm×4.6mm C18反相柱，流動(dòng)相25mmol.L^-1KH₂PO₄，流速為1mL.min^-1，溫度為31℃，測(cè)定波長(zhǎng)為214nm，進(jìn)樣量為20μL。

7.一種由權(quán)利要求1～6任意一項(xiàng)所述小麥蠶豆間作抑制蠶豆枯萎病的測(cè)定方法的小麥蠶豆間作種植方法，其特征在于，所述小麥蠶豆間作種植方法在同一塊大田上，墑面種植7-10行小麥，墑邊上種植2-4行蠶豆，蠶豆與小麥之間的行距為10-30cm，蠶豆比小麥提前播種。