[發明專利]一種乙型肝炎病毒核酸提取試劑及其提取方法在審
| 申請號: | 201810374086.2 | 申請日: | 2018-04-24 |
| 公開(公告)號: | CN108570466A | 公開(公告)日: | 2018-09-25 |
| 發明(設計)人: | 張炳強 | 申請(專利權)人: | 青島瑞思科生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548 | 代理人: | 李靜 |
| 地址: | 266000 山東省青島市高新區河*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 提取試劑 乙型肝炎病毒核酸 磁性納米顆粒 脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉 氯化鈉 硫酸銨 二甲基甲酰胺 納米氧化鐵 異硫氰酸胍 羥基丙磺酸 丙醇二酸 常溫提取 水飽和酚 提取效率 無水乙醇 游離核酸 巰基乙醇 吡咯烷酮 蛋白酶K 木糖醇 鹽酸胍 異丁醇 重量份 | ||
1.一種乙型肝炎病毒核酸提取試劑,其特征在于,所述提取試劑包含以下重量份的原料:試劑A 20-40份、試劑B 15-30份、試劑C 15-30份、試劑D 50-80份和磁性納米顆粒;試劑A包括以下重量份的原料:Tris7-16份、EDTA5-10份、NP-40 5-8份、氯化鈉1-3份、3-羥基丙磺酸6-11份、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉2-5份、異硫氰酸胍6-11份、β-巰基乙醇5-8份,水15-25份;試劑B包括以下重量份的原料:鹽酸胍5-11份、水飽和酚3-5份、硫酸銨5-7份、木糖醇1-3份、吡咯烷酮2-5份、異丁醇1-5份;試劑C包括以下重量份的原料:二甲基甲酰胺8-15份和丙醇二酸6-13份;試劑D為無水乙醇;磁性納米顆粒為納米氧化鐵。
2.根據權利要求1所述的乙型肝炎病毒核酸提取試劑,其特征在于,所述提取試劑包含以下重量份的原料:試劑A 35份、試劑B 22份、試劑C 24份和試劑D 72份。
3.根據權利要求1所述的乙型肝炎病毒核酸提取試劑,其特征在于,試劑A包括以下重量份的原料:Tris 12份、EDTA 8份、NP-40 7份、氯化鈉2份、3-羥基丙磺酸8份、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉4份、異硫氰酸胍10份、β-巰基乙醇6份,水20份。
4.根據權利要求1所述的乙型肝炎病毒核酸提取試劑,其特征在于,試劑B包括以下重量份的原料:鹽酸胍9份、水飽和酚4份、硫酸銨6份、木糖醇2份、吡咯烷酮4份、異丁醇3份。
5.根據權利要求1所述的乙型肝炎病毒核酸提取試劑,其特征在于,試劑C包括以下重量份的原料:二甲基甲酰胺12份和丙醇二酸11份。
6.一種根據權利要求1-5任一所述的乙型肝炎病毒核酸提取試劑的提取方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將試劑A、試劑B、試劑C和試劑D混合均勻,得到混合液,備用;(2)于100ul樣本中加入200ul上述混合液,然后再加入25ul磁性納米顆粒,混合后進行第一次磁分離處理,棄去第一次磁分離處理后的上清液,然后進行第二次磁分離處理,棄去第二次磁分離處理后的上清液,然后進行第三次磁分離處理,取第三次磁分離處理后的上清液,即得乙型肝炎病毒核酸。
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