[發明專利]一種從油茶籽中制備黃酮苷的方法

有效

• 申請號: 201810364358.0
• 申請日: 2018-04-23
• 公開（公告）號: CN108640956B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 鐘慧;范興勇;徐玉凌;易銘;楊永安
• 申請（專利權）人: 江蘇耐雀生物工程技術有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 南京泉為知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32408
• 代理人: 許丹丹

本發明公開一種從油茶籽中制備黃酮苷的方法，由以下步驟組成：將油茶籽脫脂，利用微生物發酵技術對油茶籽進一步處理，將處理后的油茶籽用醇水溶液提取后過濾，濾液濃縮至無醇，使用極性溶劑對濾液萃取，收集到的水液層用乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯層濃縮烘干，得到黃酮苷提取物。本發明提供的制備方法將微生物發酵技術應用于植物活性成分提取，有效提高油茶籽中黃酮苷的提取率，可用于工業化生產。

技術領域

本發明涉及微生物發酵及植物提取物技術領域，尤其涉及一種從油茶籽中制備黃酮苷的方法。

背景技術

油茶樹是我國特有的木本油料樹種，屬山茶科山茶屬，從南宋年間開始種植至今已有2300多年的歷史，并且分布廣、產量大，藥用收載部位多。素有“東方橄欖油”、“油中珍品”、“綠色油庫”、“綠色金庫”之美譽，與油橄欖、油棕、椰子并稱“世界四大木本油料樹種”。

油茶籽主要用于生產茶油和茶皂素，并有大量研究表明其具有一定的生物活性和藥理作用。近年來，國內外對油茶籽進行了一系列的研究，發現其中還含有黃酮類成分，主要是由山萘酚、黃烷酮及其糖苷組成，含量一般為0.1％～0.2％。黃酮苷是油茶籽中重要的活性成分，具有良好的清除自由基的作用，可以通過抑制一些細胞中的促炎因子如iNOS和COX-2的表達而起到優良的抗炎效果，有潛力開發為治療炎癥的臨床藥品，作為天然植物源藥品，可以避免甾族和非甾族抗炎藥的副作用。

申請號為CN201510345178.4的專利文獻公開了“高速逆流色譜制備油茶籽殼中黃酮類化合物的方法”，該方法以油茶籽殼為原料制得2個黃酮類化合物，該專利中使用多種有機溶劑。申請號為CN201310297274.7的專利文獻公開了“一種降血糖油茶黃酮的制備方法及其應用”，利用油茶籽榨油后的餅粕，進行降血糖活性成分的制備分離，不足之處在于該方法利用傳統樹脂進行分離純化，耗時長。申請號為CN201010229218.6的專利文獻公開了“一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法”，得到95％以上的黃酮苷單體，但該工藝步驟繁瑣，操作不簡便。

發明內容

本發明的目的是提供一種從油茶籽中制備黃酮苷的方法，利用微生物發酵法和有機溶劑萃取技術，使油茶籽中的活性成分黃酮苷被充分提取出來。

為達到上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

一種從油茶籽中制備黃酮苷的方法，包括：

(1)將油茶籽脫脂后制成液體培養基，然后接入黑曲霉菌進行發酵；

(2)發酵結束，將發酵料滅菌過濾，濾渣干燥粉碎后用醇-水溶液進行提取；

(3)提取完成后過濾，濾液濃縮至無醇再加入極性溶劑萃取，收集水液層；

(4)水液層用乙酸乙酯進行萃取，收集乙酸乙酯層，濃縮，干燥，得到黃酮苷提取物。

步驟(1)中，油茶籽可采用石油醚于30～80℃進一步為40～80℃回流進行脫脂。所述石油醚與油茶籽的體積比為(2～3):1。

所述液態培養基由血粉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂和水組成。以重量份計，組成為：油茶籽粕9～11份，血粉1～3份，磷酸氫二鉀0.01～0.03份，硫酸鎂0.008～0.009份，水15～18份；進一步組成為：油茶籽粕10份，血粉2份，磷酸氫二鉀0.016份，硫酸鎂0.008份，水16份。

所述發酵包括：將黑曲霉菌活化后制成種子液，然后接入液態培養基中進行發酵。

所述發酵時的接種量為5-8％。

發酵的溫度、轉速、時間會影響產物的產率和純度，所述發酵的溫度為20～40℃，搖床轉速為100～250rpm，發酵時間為3～8d；進一步優選的，所述發酵的溫度為30～35℃，搖床轉速為150～200rpm，發酵時間為4～6d；更優選的，所述發酵的溫度為30℃，搖床轉速為180rpm，發酵時間為4d。