[發明專利]一種人源細胞培養基及其制備方法

在審

• 申請號: 201810360784.7
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108424875A
• 公開（公告）日: 2018-08-21
• 發明（設計）人: 陸夢曉;劉洋;鄭媛媛;劉紅瓊;范星洲;盛小琦;貢波;吳明遠
• 申請（專利權）人: 協和華東干細胞基因工程有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 無錫市匯誠永信專利代理事務所(普通合伙) 32260
• 代理人: 張歡勇

本發明公開了一種人源細胞培養基，包括氨基酸、維生素、無機鹽、次黃嘌呤、胸苷、葡萄糖、丙酮酸鈉、亞油酸、硫辛酸、腐胺、4?羥乙基哌嗪乙磺酸。本發明通過對培養基成分的改進，根據人源細胞系的生長、代謝特點，增加了鹽酸吡哆醇、硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸鋅、氯化鎂、磷酸氫二鈉、次黃嘌呤鈉、亞油酸、硫辛酸、腐胺、胸苷等組分，更貼近于人體內細胞生長的微環境，能夠促進人源細胞生物酶的合成。優化了培養基各組分的濃度，降低了新組份帶來的不穩定性，更好的保持了培養細胞的生物特性，可減少或者免去細胞培養中血清的使用，經過測試該培養基能適合貼壁培養及懸浮培養，并適用于大多數人源細胞的培養。

技術領域

本發明涉及用于細胞培養的組合物，特別涉及一種人源細胞培養基及其制備方法。

背景技術

自建立組織和細胞培養技術以來，利用人源細胞開展現代生物制藥，特別是利用人源細胞進行組織工程研究或生物治療，不斷蓬勃發展。在這些技術中，研制適宜的培養基是其中最核心、最基礎的關鍵技術。

到目前為止，體外擴增人源細胞最常使用添加胎牛血清的基礎培養基。但是，利用胎牛血清培養細胞也帶來了不少問題。首先，胎牛血清蛋白屬異種蛋白，用胎牛血清培養的細胞用于治療后，可能導致被治療者產生感染，具有潛在危險。其次，胎牛血清可能攜帶傳播性病原體。此外，在牛的飼養過程中持續使用抗生素，也存在感染的風險。另外，胎牛血清的缺點還包括成分的不確定性、批次間的不穩定性，存儲時間短，供應時間存在周期性等。

由于血清培養細胞存在的諸多問題，促使產生了繼天然培養基、合成培養基之后的第三類培養基——無血清培養基。細胞工程中無血清培養技術的應用，在很大程度上可以減少甚至避免含血清培養所帶來的不利。

無血清培養基具有以下明顯的優缺點：

無血清培養基的優點：

(1)可避免血清批次間的不穩定性，提高細胞培養和實驗結果的可重復性。

(2)避免血清培養的細胞用于治療后引起人體的免疫反應及感染問題。

(3)避免血清受到污染引入有害的病毒。

(4)化學成分相對比較明確，可避免血清中包含的不確定組分對實驗研究的影響。

(5)易于生產，不存在胎牛血清生產的周期性。

無血清培養基的缺點：

(1)細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響，培養基的保存和應用不如傳統的合成培養基方便。

(2)成本較高。

(3)針對性強，一種無血清培養基可能僅適合某一類細胞的培養。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種適于多種類型人源細胞培養的培養基及其制備方法。

為了解決上述技術問題，本發明的技術方案為：

一種人源細胞培養基，包括氨基酸、維生素、無機鹽、次黃嘌呤、胸苷、葡萄糖、丙酮酸鈉、亞油酸、硫辛酸、腐胺、4-羥乙基哌嗪乙磺酸。

優選的，所述氨基酸包括甘氨酸、L-纈氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-蘇氨酸、L-絲氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-胱氨酸、L-酪氨酸二鈉鹽、L-賴氨酸鹽酸鹽、L-精氨酸鹽酸鹽、L-組氨酸鹽酸鹽、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-天門冬酰胺或L-天門冬氨酸中的一種或多種；

所述維生素包括葉酸、硫胺素、核黃素、維生素B12、生物素、泛酸鈣、鹽酸吡哆醛、鹽酸吡哆醇、肌醇、氯化膽鹼或煙酰胺中的一種或多種；