[發明專利]抑制MiR-29b基因表達的應用

在審

• 申請號: 201810340698.X
• 申請日: 2018-04-17
• 公開（公告）號: CN108690846A
• 公開（公告）日: 2018-10-23
• 發明（設計）人: 肖俊杰;李進;貝毅樺
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7105;A61P25/00
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 顧勇華

本發明涉及一種抑制miR?29b基因表達在制備治療肌萎縮藥物中的應用。本發明通過miRNA芯片，qRT?PCR發現在多種肌肉萎縮，包括失神經性肌萎縮、營養性肌萎縮、癌癥性肌萎縮和衰老性肌萎縮中，miR?29b表達明顯升高，進一步的功能性實驗發現抑制miR?29b的表達可以治療多種肌肉萎縮的作用。據此，可將miR?29b應用于肌肉萎縮的診斷或開發抑制肌肉萎縮的藥物。

技術領域

本發明涉及一種抑制miR-29b基因表達在制備治療肌萎縮藥物中的應用。

背景技術

周圍神經損傷所致的失神經肌萎縮是臨床常見的肌萎縮類型之。失神經肌萎縮主要特點是肌肉因神經損傷致神經營養的缺乏而迅速出現萎縮，目前治療以顯微外科技術修復損傷的神經為主，但由于神經軸突完全長入需歷經一段較長的時間，在重新構建近端神經元之間傳導束的聯結和遠端神經軸突末梢--肌肉運動終板的連接之前，喪失神經營養支配的骨骼肌群將很快出現萎縮。骨骼肌質量下降會導致患者的運動明顯受限，而廢用將進一步加重肌萎縮，產生惡性循環，導致神經修復手術效果受限。

失神經肌萎縮診斷與治療中，早期診斷和干預至關重要。早期失神經肌萎縮在臨床癥狀(無力，酸痛)，體征(肌肉周徑)，輔助檢查(肌電圖)上表現均不是很明顯，為早期診斷帶來了極大的困難。患者的生化指標中，肌酸肌酶可能會有異常體現，但特異性不強。臨床上針對失神經支配所致骨骼肌肌萎縮的預防，目前主要采用運動康復訓練、電刺激療法、神經營養藥物等。其中，運動訓練是臨床應用最為廣泛而有效的干預措施，但失神經所致肌萎縮患者往往主動運動障礙，而被動運動對肌萎縮治療效果不佳。綜上，從分子水平尋找到早期失神經肌萎縮的診斷指標與干預靶點具備重要的臨床意義。

非編碼RNA在基因表達中的調控作用越來越受到重視，具備多樣化的功能，參與調控了幾乎所有的基因表達。miRNA是一類進化保守、具有轉錄后調控基因且影響RNA沉默的調節短鏈核酸，一般長度為22個核苷酸序列。這一類內源性的非編碼RNA常常通過與mRNA3’端非翻譯區部分的互補調控基因或者干擾蛋白的翻譯實現轉錄后水平調控。既往研究表明，miRNA在肌肉生長和分化中也起著重要作用。如miR-1能抑制HDAC4的活性，促進肌細胞分化；而miR-133則是通過抑制SRF的表達促進肌肉細胞的增生，在失神經肌萎縮中，miR-1與miR-133的表達也有明顯變化，具體機制尚不清楚。Wada等(2011，J Biol Chem，286(44):38456–38465)發現miR-23a能夠抑制肌萎縮基因的表達從而抑制肌萎縮的發生。基于該發現，近期王飛等(一種用于檢測肌萎縮的方法及試劑盒，公布號：CN 106011248 A)建立了一種用于檢測肌萎縮的方法，該發明首次發現人體肌萎縮時血清miR-23a表達顯著升高，進一步通過肌萎縮的動物模型證明肌萎縮的發生與循環miR-23a表達的動態相關性，同時該發明還提供了一種定量檢測血清中miR-23a的試劑盒，可用于無創檢測人體肌萎縮。目前尚無其他關于miRNA對肌肉萎縮診斷與治療的發明。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種抑制miR-29b基因表達在制備治療肌萎縮藥物中的應用。

所述的肌萎縮為：失神經性肌萎縮、營養性肌萎縮、癌癥性肌萎縮或衰老性肌萎縮。

該發明中miR-29b是一種對肌肉萎縮有調控作用的微小RNA(miRNA)，為一段保守的核苷酸序列，其特征在于該所述的miRNA核苷酸序列為UAGCACCAUUUGAAAUCAGUGUU,包含其分離的核酸分子與其前體或成熟體,同時包含基于該核酸分子進行修飾后的核苷酸序列。