[發明專利]豬瘟病毒單克隆抗體HK 44及醫用用途

有效

• 申請號: 201810331553.3
• 申請日: 2018-04-13
• 公開（公告）號: CN108530532B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 歐陽紅生;蘇昂;逄大欣;董海司;董建偉
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

本發明提供了一種豬瘟病毒單克隆抗體HK 44，能與豬瘟病毒E2蛋白特異性地結合,并且能夠十分有效地阻斷病毒對細胞的侵入,對細胞有明顯的保護作用?？捎糜卺槍关i瘟病毒的生物制劑的研發，以及豬瘟病毒檢測的相關研究。

技術領域

本發明屬于生物技術和分子免疫學領域，涉及一種能有效抗豬瘟病毒抗體HK 44及其相應序列。具體為抗豬瘟病毒E2蛋白的抗體及醫用用途。

技術背景

豬瘟（Classical swine fever, CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fevervirus, CSFV）感染引起豬的一種烈性傳染病，被世界動物衛生組織（OIE）列為須申報的動物傳染病目錄，具有急性、熱性、高度接觸性等特點。在危害我國養豬業的疾病和疫情中，豬瘟是具有代表性的重大疫病。

豬瘟病毒結構蛋白主要包括C蛋白和E2（gp55），囊膜糖蛋白Erns（gp44/48）和E1（gp33）蛋白。位于病毒粒子表面的E2 為囊膜糖蛋白，是在CSFV中起保護作用的抗原蛋白，主要存在形式為同源二聚體E2-E2 或異源E1-E2 二聚體，能夠使宿主的免疫系統激活，產生中和抗體，是與宿主相互作用的主要靶點。在CSFV 病毒粒子的表面，E2 蛋白被認為是有可能作為的受體結合的主要蛋白之一。

抗體（Antibody）,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一種能特異性結合抗原的蛋白,由B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞產生，是介導體液免疫的重要免疫分子。作為抵御清除機體內外來病原微生物的主要應答分子，其在疾病的免疫預防、診斷和治療等方面有著重要的使用價值。由于其作用的特異性、高效性，已廣泛應用于抗病毒等方面的研究。

本發明針對豬瘟病毒E2蛋白，提供了一種具有中和活性的豬瘟病毒特異性單克隆抗體，為豬瘟病毒血清學的快速診斷，開發豬瘟新型疫苗及豬瘟的防治提供了候選者。

發明內容

本發明提供了一種能夠結合豬瘟病毒E2蛋白，并且有效中和豬瘟病的抗體HK44及其序列。

本發明所述的一種豬瘟病毒單克隆抗體HK44，包括輕鏈和重鏈，其特征在于：

所述單克隆抗體的重鏈全長氨基酸序列為SEQ ID 1，可變區氨基酸序列為序列表中的SEQ ID 3；

所述單克隆抗體的輕鏈全長氨基酸序列為SEQ ID 5，可變區氨基酸序列為序列表中的SEQ ID 7；

所述的豬瘟病毒單克隆抗體HK44，其特征在于：

能夠編碼抗體重鏈全長核酸序列為SEQ ID 2；所述抗體的重鏈可變區包含核苷酸序列為SEQ ID 4；

能夠編碼抗體輕鏈全長核酸序列為SEQ ID 6；所述抗體的輕鏈可變區包含核苷酸序列為SEQ ID 8。

所述單克隆抗體或其抗原結合片段選自Fab、Fab’、F (ab’)₂、Fd、Fv、Fc、dAb、互補決定區片段、單鏈抗體。

所述的單克隆抗體包括非CDR區，且所述非CDR區來自不是豬類的物種。

所述的豬瘟病毒單克隆抗體HK44在診斷或檢測豬瘟病毒試劑中的用途。

所述的豬瘟病毒單克隆抗體HK44在預防治療豬瘟生物制劑中的用途。

本發明豬瘟病毒單克隆抗體HK44的制備方法，包括以下步驟：

在豬21-30日齡和65日齡時分別注射1次豬瘟疫苗，間隔一周后加強免疫一次，共免疫三次。用豬瘟病毒抗體檢測試劑盒檢測免疫后豬血清中抗體含量，選擇抗體含量較高的實驗豬，前腔靜脈采血獲得血樣，之后使用淋巴細胞分離液對血樣進行密度梯度離心，分離出豬淋巴細胞；