[發明專利]克羅恩病相關的尿液蛋白質標記物的篩選及其用途

在審

• 申請號: 201810326399.0
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN110376271A
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發明（設計）人: 高友鶴;秦偉偉
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;G01N30/02
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

1.一種建立用于篩選與克羅恩病相關的尿液蛋白質標記物的動物模型的方法，所述方法包括以下步驟：

i)通過灌腸注入TNBS乙醇溶液或通過灌腸注入生理鹽水分別獲得患有克羅恩病的大鼠模型和對照大鼠模型；

ii)收集步驟i)中獲得的患有克羅恩病的大鼠模型和對照大鼠模型的尿液；和

iii)通過質譜分析鑒定步驟ii)中收集的患有克羅恩病的大鼠模型和對照大鼠模型尿液中的蛋白質譜。

2.根據權利要求1所述的方法，其中在步驟ii)中收集灌腸注入TNBS乙醇溶液或通過灌腸注入生理鹽水之后第2或7天的大鼠尿液。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其進一步包括步驟iv)比較步驟iii)中獲得的患有克羅恩病的大鼠模型和對照大鼠模型尿液中的蛋白質譜，獲得差異表達的蛋白質。

4.通過灌腸注入TNBS乙醇溶液獲得的患有克羅恩病的大鼠模型在制備用于篩選與克羅恩病相關的尿液蛋白質標記物的動物模型中的用途。

5.根據權利要求4所述的用途，其中通過鑒定患有克羅恩病的大鼠模型尿液中的蛋白質譜獲得與克羅恩病相關的尿液蛋白質標記物。

6.用于檢測一種或多種根據權利要求1-3中任一項所述的方法獲得的尿液蛋白質標記物的試劑在制備用于診斷受試者中克羅恩病的試劑盒中的用途。

7.根據權利要求6所述的用途，其中所述一種或多種根據權利要求1-3中任一項所述的方法獲得的尿液蛋白質標記物選自核糖核酸酶胰腺γ型(RNS1G)、中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、基質金屬蛋白酶8(MMP8)、二-N-乙酰膽堿酯酶(DIAC)、果糖二磷酸醛縮酶B(ALDOB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(G3P)、中性和堿性氨基酸轉運蛋白Rbat(SLC31)、鈉依賴性中性氨基酸轉運蛋白B(S6A18)、二氫硫辛酸脫氫酶，線粒體(DLDH)、溶酶體相關膜糖蛋白1(LAMP1)、β-甘露糖苷酶(MANBA)、神經膠質原(NPTN)、谷氨酸-半胱氨酸連接酶調節亞基(GSH0)、γ-谷氨酰轉肽酶1(GGT1)、腺苷酸激酶同工酶1(KAD1)、酯水解酶C11或f54同系物(CK054)、Collectrin(TMM27)和碳酸酐酶1(CAH1)。

8.根據權利要求6或7所述的用途，其中所述試劑用于檢測受試者的尿液蛋白質譜，所述尿液蛋白質譜由核糖核酸酶胰腺γ型(RNS1G)、中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、基質金屬蛋白酶8(MMP8)、二-N-乙酰膽堿酯酶(DIAC)、果糖二磷酸醛縮酶B(ALDOB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(G3P)、中性和堿性氨基酸轉運蛋白Rbat(SLC31)、鈉依賴性中性氨基酸轉運蛋白B(S6A18)、線粒體二氫硫辛酸脫氫酶(DLDH)、溶酶體相關膜糖蛋白1(LAMP1)、β-甘露糖苷酶(MANBA)、神經膠質原(NPTN)、谷氨酸-半胱氨酸連接酶調節亞基(GSH0)、γ-谷氨酰轉肽酶1(GGT1)、腺苷酸激酶同工酶1(KAD1)、酯水解酶C11或f54同系物(CK054)、Collectrin(TMM27)和碳酸酐酶1(CAH1)組成。

9.根據權利要求8所述的用途，其中在所述尿液蛋白質譜中，與對照組相比，核糖核酸酶胰腺γ型(RNS1G)、中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、基質金屬蛋白酶8(MMP8)、二-N-乙酰膽堿酯酶(DIAC)、線粒體二氫硫辛酸脫氫酶(DLDH)、溶酶體相關膜糖蛋白1(LAMP1)、β-甘露糖苷酶(MANBA)和神經膠質原(NPTN)上調；以及果糖二磷酸醛縮酶B(ALDOB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(G3P)、中性和堿性氨基酸轉運蛋白Rbat(SLC31)、鈉依賴性中性氨基酸轉運蛋白B(S6A18)、谷氨酸-半胱氨酸連接酶調節亞基(GSH0)、γ-谷氨酰轉肽酶1(GGT1)、腺苷酸激酶同工酶1(KAD1)、酯水解酶C11或f54同系物(CK054)、Collectrin(TMM27)和碳酸酐酶1(CAH1)下調。

10.根據權利要求6-9任一項所述的用途，其中所述受試者是人。