[發明專利]一種光動力治療復合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201810325474.1
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN108421041B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 王樹;蔣林冶;任雪芹;劉禮兵;呂鳳婷
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K9/51;A61K47/24;A61K31/502;A61K31/765;A61K33/40;A61K47/64;A61K47/69;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種復合物，由納米粒子、血紅蛋白和磷脂層組成；

所述納米粒子由式I和式II所示化合物自組裝而得；

所述血紅蛋白修飾于所述納米粒子表面；

所述磷脂層包覆所述血紅蛋白和納米粒子；

所述式I中，n為560-960。

2.根據權利要求1所述的復合物，其特征在于：所述血紅蛋白選自牛血紅蛋白、豬血紅蛋白和人血紅蛋白中的至少一種；

所述血紅蛋白的分子量為60-70kDa；

構成所述磷脂層的材料為POPC、DOPE、DOTAP和膽固醇；

所述式I所示化合物與式II所示化合物的質量比為1-5：1；

所述納米粒子與所述血紅蛋白的摩爾比為1：2-5；

所述納米粒子與POPC的質量比為1：10-20；

所述POPC、DOPE、DOTAP和膽固醇的質量比為5-6:3.5-4.5:0.2-0.3:0.2-0.3。

3.根據權利要求2所述的復合物，其特征在于：所述血紅蛋白的分子量為68kDa；

所述式I所示化合物與式II所示化合物的質量比為2:1；

所述POPC、DOPE、DOTAP和膽固醇的質量比為6:3.5:0.3:0.2。

4.一種制備權利要求1-3任一所述復合物的方法，包括如下步驟：

1）將式I和式II所示化合物進行自組裝，得到納米粒子；

2）在酰胺縮合反應的條件下，將步驟1）所得納米粒子與所述血紅蛋白進行反應，得到中間產物；

3）將構成所述磷脂層的材料和膽固醇于溶劑中混合成膜后，加入步驟2）所得中間產物后水化，將所得乳濁液用聚碳酸酯膜擠出，即得。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述步驟1）自組裝步驟中，式I所示化合物與式II所示化合物的質量比為1-5：1；所用溶劑為四氫呋喃；

所述自組裝的方法包括：將所述式I和式II所示化合物溶解于所述溶劑中后于超純水中進行超聲分散后攪拌，過濾而得；

所述超聲分散步驟中，超聲功率為50-60W；超聲時間為3-5min；

所述攪拌步驟中， 溫度為常溫；時間為8-20小時，

所述過濾步驟中，濾膜孔徑為0.2-0.22μm；

所述步驟2）酰胺縮合反應步驟中，所用活化劑為NHS和EDC；

步驟1）所得納米粒子與所述血紅蛋白的摩爾比為1：2-5；

所述酰胺縮合反應在緩沖溶液中進行；

反應溫度為20-30℃；

反應時間為12-36h。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述步驟1）自組裝步驟中，式I所示化合物與式II所示化合物的質量比為2:1；所用溶劑為四氫呋喃；

所述攪拌步驟中，時間為12小時；

所述緩沖溶液為pH值為7.4的PBS緩沖液；

反應溫度為25℃；

反應時間為24h。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述步驟3）中，構成所述磷脂層的材料為POPC、DOPE和DOTAP；

所述納米粒子與POPC的質量比為1：10-20；

所述POPC、DOPE、DOTAP和膽固醇的質量比為5-6:3.5-4.5:0.2-0.3:0.2-0.3；

所述溶劑為氯仿；

所述POPC、DOPE、DOTAP和膽固醇在所述溶劑中的濃度均為8-12 mg/mL；

所述成膜步驟中，成膜方法為旋轉蒸發除溶劑；

所述水化步驟中，溫度為25-37℃；時間為1-2h；

所述擠出步驟中，所述聚碳酸酯膜的孔徑為150-250nm；

擠出次數為8-10次。