[發明專利]一種氧化石墨烯對核酸負載量的分析方法

在審

• 申請號: 201810325117.5
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN108982436A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 李磊;褚茂平;陳永輝;劉暢;林振坤;王潔;王瑤堯;曾靜靜;金其可
• 申請（專利權）人: 溫州醫科大學附屬第二醫院;溫州醫科大學附屬育英兒童醫院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 溫州名創知識產權代理有限公司 33258
• 代理人: 陳加利

本發明公開了一種氧化石墨烯對核酸負載率的分析方法，包括以下步驟：（1）繪制核酸的熒光信號標準曲線（2）氧化石墨烯淬滅熒光（3）計算氧化石墨烯對核酸的負載率，負載率L為負載的核酸質量與氧化石墨烯質量的比值，計算公式：L=(C₁?C₂) V/C_GOV×%=(C₁?C₂)/ C_GO×%=(n₁?n₂) M/C_GO×%，其中C₁和C₂分別為負載前后溶液中核酸的質量濃度，C_GO為溶液中GO的質量濃度，V為溶液體積，n₁和n₂分別為負載前后溶液中核酸的摩爾濃度，M為核酸的摩爾質量。本發明的優點是該方法基于氧化石墨烯的熒光淬滅特性，能夠快速實現對氧化石墨烯所負載的核酸分子進行定量分析和計算。

技術領域

本發明屬于生物大分子分析領域，具體是指一種對氧化石墨烯所負載的核酸分子進行定量分析和計算的方法。

背景技術

石墨烯是由碳原子以sp²雜化軌道形成的二維周期性蜂窩狀點陣結構。石墨烯是構成其他石墨材料的基本單元，可以構筑零維富勒烯、一維碳納米管和三維體相石墨。石墨烯的基本結構單元是有機材料中最穩定的苯六元環，因此它是當前最理想的二維納米材料。石墨烯材料具有許多優異的性能，例如良好的導電和導熱性能、超高的機械強度及獨特的電學性質。石墨烯及其衍生物已被廣泛應用包括材料科學、電子學、能源技術、催化科學等在內的眾多領域。

氧化石墨烯（以下簡稱GO）是當前最為常見的石墨烯衍生物之一，由石墨烯氧化加工而成。GO碳層上富含環氧基、羥基、羧基等官能團，具有水溶性好、表面易于修飾等特性，因而在檢測領域具有廣泛的應用（參看Guo S et.al, Graphene nanosheet: synthesis,molecular engineering, thin film, hybrids, and energy and analyticalapplications, Chem Soc Rev 2011,40:2644-2672）。

目前氧化石墨烯（GO）已經成為一個通用的檢測平臺，可應用于核酸、蛋白質、核酸酶、小分子、金屬離子等檢測。將核酸分子探針與GO相結合是GO應用于檢測領域的一個重要途徑。例如，郭爽等以肽核酸為分子探針、以GO為檢測平臺，實現對DNA的熒光傳感檢測（參看郭爽，基于氧化石墨烯的熒光核酸生物傳感器，湖北中醫藥大學碩士學位論文，2014）；張治紅等利用GO可以吸附ssDNA的特性，現實對人源肝癌細胞株SMMC-7721腫瘤細胞的快速靈敏檢測（參看謝琴等，基于氧化石墨烯的核酸適配體熒光傳感器用于人肝癌細胞SMMC-7721的高靈敏檢測，中國化學會第29屆學術年會摘要集—第04分會：納米生物傳感新方法，2014）。

值得關注的是，GO-核酸體系能夠順利應用于檢測各類目標物的前提是兩者的有效結合，即核酸分子能夠成功負載到GO表面。因此，對負載到GO表面的核酸分子進行定量分析十分重要?？刹捎秘撦d率來表征核酸分子是否成功與GO相結合以及所結合的比例。遺憾的是，目前為止還沒有文獻報道關于GO對核酸分子負載率的分析和計算方法。

為此，本發明人研發一種快速靈敏的氧化石墨烯對核酸分子負載率的分析方法，以解決現有技術所存在的問題。

發明內容

本發明實施例所要解決的技術問題在于，提供一種氧化石墨烯對核酸負載率的分析方法，該分析方法基于氧化石墨烯的熒光淬滅特性，能夠快速實現對氧化石墨烯所負載的核酸分子進行定量分析和計算。

為實現上述目的，本發明的技術方案是包括以下步驟：