[發明專利]抗HER2抗原的人源化抗體H5L5及其應用

在審

• 申請號: 201810320106.8
• 申請日: 2018-04-11
• 公開（公告）號: CN108484772A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 曹誠;周瑞;朱林;靳彥文;張部昌
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院;安徽大學
• 主分類號: C07K16/32
• 分類號: C07K16/32;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;秦夢楠

本發明公開了一種抗HER2抗原的人源化抗體H5L5及其應用。本發明提供了一種IgG，其重鏈可變區中的CDR1、CDR2和CDR3依次如序列表的序列1自N端第50?54位氨基酸殘基、第69?85位氨基酸殘基和第118?128位氨基酸殘基所示，其輕鏈可變區中的CDR1、CDR2和CDR3依次如序列表的序列3自N端第44?54位氨基酸殘基、第70?76位氨基酸殘基和第109?117位氨基酸殘基所示。實驗結果證實，本發明提供的抗體與HER2抗原具有良好的結合活性和促使腫瘤細胞凋亡的活性，且與曲妥珠單抗具有不同的抗原表位。本發明提供的人源化抗體H5L5及其制備方法在治療腫瘤的領域將有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種抗HER2抗原的人源化抗體H5L5及其應用。

背景技術

乳腺癌是一種嚴重危害女性健康的惡性腫瘤，全球每年新增乳腺癌約有120萬人，發病率占全身各種惡性腫瘤的7-10％。乳腺癌的治療方式目前主要包括手術治療、化療、放療與生物治療。1987年，研究發現在乳腺癌亞型中大約有15-20％乳腺癌細胞表面過量表達人表皮生長因子受體2(HER2)。HER2蛋白是具有受體酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，屬表皮生長因子受體家族(包括EGFR、HER2、HER3與HER4)成員之一。HER2在細胞分化與增殖中發揮重要作用，HER2過量表達的乳腺癌一般預后不良，如生存率低、復發間隔短與轉移發生率增加。因此，HER2可以作為乳腺癌生物靶向治療的重要靶標。

1998年，美國FDA批準靶向HER2人源化單克隆抗體——曲妥珠單抗(trastuzumab，又名赫賽汀)用于HER2陽性乳腺癌治療的一線藥物。2015年，曲妥珠單抗的全球銷售額達65.6億美元。曲妥珠單抗對HER2信號通路的影響包括細胞周期阻滯、細胞凋亡與血管生成抑制等。目前關于曲妥珠單抗的作用機制主要包括：PI3K/AKT和MAPK信號通路的抑制作用；阻止HER2胞外區的裂解；抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用和補體依賴的細胞毒作用。

曲妥珠單抗可顯著提高HER2高表達乳腺癌的治療效果，然而，曲妥珠單抗的原發性和獲得性耐受給臨床帶來較大的挑戰，因此研發出親和力高或具有不同靶標位置的人源化抗體顯得尤為重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種抗HER2抗原的人源化抗體H5L5及其應用。

本發明提供了一種IgG(命名為H5L5抗體)，其重鏈可變區中的CDR1、CDR2和CDR3依次如序列表的序列1自N端第50-54位氨基酸殘基、第69-85位氨基酸殘基和第118-128位氨基酸殘基所示，其輕鏈可變區中的CDR1、CDR2和CDR3依次如序列表的序列3自N端第44-54位氨基酸殘基、第70-76位氨基酸殘基和第109-117位氨基酸殘基所示。

所述重鏈可變區如序列表的序列1自N端第20-139位氨基酸殘基所示。

所述輕鏈可變區如序列表的序列3自N端第21-128位氨基酸殘基所示。

所述重鏈為如下(a1)或(a2)：(a1)序列表的序列1自N端第20-469位氨基酸殘基組成的蛋白質；(a2)序列表的序列1所示的蛋白質。

所述輕鏈為如下(b1)或(b2)：(b1)序列表的序列3自N端第21-234位氨基酸殘基組成的蛋白質；(b2)序列表的序列3所示的蛋白質。

編碼以上任一所述IgG的基因也屬于本發明的保護范圍。

編碼所述重鏈的基因為如下(c1)或(c2)或(c3)：

(c1)序列表的序列2自5’端第77-1426位核苷酸所示的DNA分子；

(c2)序列表的序列2自5’端第20-1429位核苷酸所示的DNA分子；

(c3)序列表的序列2所示的DNA分子。