[發明專利]南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙含量的檢測方法

有效

• 申請號: 201810315117.7
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108508112B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 孫艷濤;劉洋;郭彩芳;高秀紅;趙磊;劉子明
• 申請（專利權）人: 吉林師范大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司 22204
• 代理人: 唐盼

本發明公開了一種南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙含量的檢測方法，包括：（1）雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙對照品溶液的制備；（2）供試品溶液的制備：南蛇藤藥材粉碎（過四號篩），取1.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈25 mL，稱定重量，超聲處理（功率300 W，頻率40 kHz）30 min，用乙腈補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；（3）色譜條件：流動相為乙腈：0.1%磷酸水=80：20；檢測波長為203nm；流速：1.0 mL·min^?1；檢測器：紫外；柱溫：30℃；進樣量：10μL。該方法簡單，專屬性強，重現性好，能夠對南蛇藤藥材的品質進行有效評價。

技術領域

本發明屬于中藥材質量控制技術領域，具體涉及南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙含量的檢測方法。

背景技術

南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb.)是衛矛科南蛇藤屬植物，又名過山風，全國大部分地區均有分布。中醫認為南蛇藤具有清熱、祛風、除濕、活血解毒消腫的功效，常用于治療風濕性關節炎、腰腿痛、筋骨痛、牙痛、閉經、痢疾、跌打損傷、腸風痔漏、毒蛇咬傷、瘡瘍、癰癤等癥；此外，現代藥理研究表明，南蛇藤提取物還具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等作用。

南蛇藤中含有較高的雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙活性成分，文獻報道雷公藤內酯可誘導腫瘤細胞的凋亡，是抗腫瘤活性的有效成分，因此，有必要對南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙的含量進行檢測。目前，采用高效液相色譜法測定南蛇藤藥材中的有效成分含量尚未見報道。本發明采用高效液相色譜法測定了南蛇藤藥材中有效成分雷公藤內酯甲和雷公藤內酯乙的含量，是一種快速、高效、可行的檢測方法，為南蛇藤的質量評價提供依據。

發明內容

本發明的目的在于提供一種南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙含量的檢測方法，以解決現有南蛇藤藥材質量無法保證的技術難題。

為實現上述目的，本發明是采用如下技術方案實現的：

一種南蛇藤中雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙含量的檢測方法，所述方法采用高效液相色譜法測定雷公藤內酯甲、雷公藤內酯乙的含量，具體操作步驟如下：

(1)雷公藤內酯甲對照品溶液的制備：精密稱取雷公藤內酯甲對照品適量，用乙腈溶解并稀釋成含雷公藤內酯甲50μg·mL^-1的對照品溶液；

(2)雷公藤內酯乙對照品溶液的制備：精密稱取雷公藤內酯乙對照品適量，用乙腈溶解并稀釋成含雷公藤內酯乙50μg·mL^-1的對照品溶液；

(3)供試品溶液的制備：南蛇藤藥材粉碎(過四號篩)，取1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈25mL，稱定重量，超聲處理(功率300W，頻率40kHz)30min，用乙腈補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

或取南蛇藤藥材粉末2.002g，置索氏提取器中，加甲醇50ml，加熱回流3小時，放冷，采用50ml甲醇蕩洗索氏提取器，合并甲醇提取液，提取液采用旋轉蒸發儀旋轉至近干，加入2.0g硅藻土拌樣，溶劑揮干，加入氯仿超聲20min提取3次，每次30ml，濾過，合并提取液，旋轉蒸發儀旋轉蒸干，殘渣采用乙腈：0.1％磷酸水溶液＝80：20溶解并定容至25mL容量瓶中，搖勻，濾過，得供試品溶液；

(4)高效液相色譜法測定：

色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈：0.1％磷酸水＝80：20；檢測波長為203nm；流速：1.0mL·min^-1；檢測器：紫外；柱溫：30℃；進樣量：10μL；

測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜，測定，記錄40min的色譜圖，即得。