[發明專利]一種溶藻弧菌噬菌體制劑、制備方法及其應用在審
| 申請號: | 201810313360.5 | 申請日: | 2018-04-09 |
| 公開(公告)號: | CN108651522A | 公開(公告)日: | 2018-10-16 |
| 發明(設計)人: | 羅鵬;盧澤禹;田雨順;云龍;朱婉君 | 申請(專利權)人: | 廣州諾晶生物技術有限公司 |
| 主分類號: | A01N63/00 | 分類號: | A01N63/00;A01N1/00;A61K35/76;A61P31/04;A61P31/02 |
| 代理公司: | 廣州三環專利商標代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋靜娜;郝傳鑫 |
| 地址: | 510000 廣東省廣州市*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 噬菌體制劑 溶藻弧菌 噬菌體 制備 海水養殖動物 水產養殖業 毒副作用 水體環境 消毒制劑 新型綠色 海藻糖 宿主菌 輔劑 可用 抗生素 施用 應用 感染 平衡 健康 開發 | ||
1.一種溶藻弧菌噬菌體制劑,其特征在于,包括噬菌體Vp670和輔劑,所述輔劑包括海藻糖。
2.根據權利要求1所述的溶藻弧菌噬菌體制劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將溶藻弧菌菌液與噬菌體Vp670培養液混合,形成混合培養液,搖動培養3~5h;
(2)在步驟(1)中的混合培養液加入氯仿,氯仿與混合培養液的體積比為0.05%~0.1%,搖動培養10~15min后;
(3)過濾培養液;
(4)在步驟(3)的濾液中加入海藻糖,充分混勻,海藻糖與濾液的質量比為0.2%~0.4%,得到所述的噬菌體制劑。
3.根據權利要求2所述的溶藻弧菌噬菌體制劑的制備方法,其特征在于,所述步驟(1)中,包括以下步驟:
1)采用LB培養基過夜培養溶藻弧菌E06333,將過夜培養的溶藻弧菌E06333按1%的體積比例接種至新的LB培養基中,培養至OD600nm為0.4,獲得溶藻弧菌液;
2)取溶藻弧菌液和噬菌體Vp670種子液按24:1的體積比混勻,30℃搖床培養3小時,離心后取上清,獲得噬菌體Vp670一級培養液;
3)將噬菌體Vp670一級培養液按1%的體積比與溶藻弧菌液混勻,30℃搖床培養3小時,獲得噬菌體Vp670二級培養液;
4)以VAM培養基過夜培養溶藻弧菌E06333,培養溫度30℃;
5)將步驟4)的溶藻弧菌E06333培養液按1%的體積比加入到新的VAM培養基中,30℃培養至OD600nm為0.4~0.6;
6)將噬菌體Vp670二級培養液按2%~5%的體積比加入到步驟5)的溶藻弧菌E06333培養液中,30℃搖動培養3~5小時,得到混合培養液。
4.根據權利要求2所述的溶藻弧菌噬菌體制劑的制備方法,其特征在于,所述步驟(4)中,海藻糖與濾液的質量比為0.3%。
5.根據權利要求1所述的溶藻弧菌噬菌體制劑或根據權利要求2~4任一項所述方法制備得到的溶藻弧菌噬菌體制劑在水產養殖中裂解溶藻弧菌的應用。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,所述應用包括用于水體除菌、用于養殖動物體表除菌中的至少一種。
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