[發(fā)明專利]一種NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810285857.0
• 申請(qǐng)日: 2018-04-03
• 公開（公告）號(hào): CN108828216A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曲軍衛(wèi);王金華;徐恒;陸上蘇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省腫瘤防治研究所（江蘇省腫瘤醫(yī)院）
• 主分類號(hào): G01N33/574
• 分類號(hào): G01N33/574;G01N33/532;G01N33/543
• 代理公司: 南京禹為知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32272
• 代理人: 王曉東

本發(fā)明公開了一種NTN?4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒及應(yīng)用，本發(fā)明經(jīng)20％蔗糖保護(hù)劑保護(hù)的預(yù)包被抗NTN?4單克隆抗抗體的化學(xué)發(fā)光板穩(wěn)定性達(dá)1年。本發(fā)明試劑盒的擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)可達(dá)r＝0.9987，大于0.9900；準(zhǔn)確性結(jié)果相對(duì)偏差為3.06％，小于10％；檢測(cè)限為0.88ng/mL；線性考察，濃度值擬合直線的相關(guān)系數(shù)r＝0.9996，相關(guān)系數(shù)大于0.9900；重復(fù)性結(jié)果的變異系數(shù)CV均小于10％；在應(yīng)用于臨床樣本的檢測(cè)中能夠明顯的區(qū)分正常人和病人。該試劑盒展示了良好的準(zhǔn)確性、線性、重復(fù)性、最低檢測(cè)限，具有良好的測(cè)定血清中的NTN?4蛋白的濃度的能力，能夠作為檢測(cè)胃癌的輔助診斷。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒及應(yīng)用。

背景技術(shù)

胃癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤之一，據(jù)世界衛(wèi)生組織/國(guó)際癌癥研究中心(IARC)公布的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2012年全球胃癌新病例95.2萬(wàn)，中國(guó)胃癌新發(fā)病例40.5萬(wàn)，占全球胃癌發(fā)病的42.6％；2012年全球范圍內(nèi)胃癌死亡病例72.3萬(wàn)，死亡率為10.2/10萬(wàn)，我國(guó)胃癌死亡病例32.5萬(wàn)，死亡率為21.9/10萬(wàn)。全國(guó)死因回顧抽樣調(diào)查報(bào)告數(shù)據(jù)顯示，2004～2005年全國(guó)胃癌從1973～1975年和1990～1992年均穩(wěn)居惡性腫瘤首位后移至肺癌和肝癌之后的第3位。可見，我國(guó)屬于胃癌發(fā)病率和死亡率均較高的國(guó)家。

神經(jīng)導(dǎo)向因子4(netrin-4，NTN-4)是一種分泌蛋白，可與不同受體結(jié)合，參與神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移等生理功能。NTN-4具有誘導(dǎo)細(xì)胞和軸突遷移的功能，能促進(jìn)神經(jīng)突生長(zhǎng)，是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)展中細(xì)胞和軸突遷移必需的趨向性化學(xué)信號(hào)。體內(nèi)研究表明，NTN-4具有調(diào)節(jié)血管生成和促淋巴管形成作用，從而影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移；體外研究發(fā)現(xiàn)，NTN-4對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移等有不同的作用，可能與NTN-4和不同受體結(jié)合有關(guān)。腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)與NTN-4的濃度具有相關(guān)性，NTN-4在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)與甲基化有關(guān)。因此，NTN-4及其受體在腫瘤的生長(zhǎng)，轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮作用。

現(xiàn)有NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)試試劑盒檢測(cè)的準(zhǔn)確度、靈敏度仍然不足，鑒于此，建立一種有效、快速、簡(jiǎn)單、靈敏的檢測(cè)NTN-4的方法，應(yīng)用于腫瘤的輔助診斷或療效監(jiān)測(cè)與預(yù)后具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本部分的目的在于概述本發(fā)明的實(shí)施例的一些方面以及簡(jiǎn)要介紹一些較佳實(shí)施例。在本部分以及本申請(qǐng)的說明書摘要和發(fā)明名稱中可能會(huì)做些簡(jiǎn)化或省略以避免使本部分、說明書摘要和發(fā)明名稱的目的模糊，而這種簡(jiǎn)化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。

鑒于上述的技術(shù)缺陷，提出了本發(fā)明。

因此，作為本發(fā)明其中一個(gè)方面，本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：一種NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒，其包括，NTN-4標(biāo)準(zhǔn)品溶液、NTN-4質(zhì)控品溶液、樣本稀釋液、生物素標(biāo)記抗NTN-4單克隆抗體、辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈酶親和素、抗體稀釋液、化學(xué)發(fā)光溶液、濃縮洗滌液、化學(xué)發(fā)光板，所述化學(xué)發(fā)光板上包被有抗NTN-4單克隆抗體，所述抗NTN-4單克隆抗體包被濃度為2～3μg/mL。

作為本發(fā)明所述NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒的一種優(yōu)選方案，其中：所述化學(xué)發(fā)光板為不透明聚苯乙烯化學(xué)發(fā)光板，所述化學(xué)發(fā)光板上包被有抗NTN-4單克隆抗體，所述抗NTN-4單克隆抗體包被濃度為2.5μg/mL。

作為本發(fā)明所述NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒的一種優(yōu)選方案，其中：所述試劑盒的檢測(cè)樣本為人血清樣本。

作為本發(fā)明所述NTN-4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒的一種優(yōu)選方案，其中：所述NTN-4的標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度分別為：0、1.25、2.5、5、10、20ng/mL。