[發明專利]基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法

在審

• 申請號: 201810282999.1
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN108519447A
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 劉俊;楊忠;向麗;劉建;王翀;殷新;陳斌武;王梁;孫濤;雷勇輝
• 申請（專利權）人: 新疆出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 蘇州集律知識產權代理事務所(普通合伙) 32269
• 代理人: 安紀平

本發明公開了一種基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，包括以下步驟，標準儲備液和標準工作液的配制；干果樣品預處理；固相萃取處理；配置超高效液相色譜儀的色譜條件；通過超高效液相色譜對測定溶液內11種酸性染料進行色譜分析，得到干果內11種酸性染料的檢出量。本發明的基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，能夠通過超高效液相色譜法測定干果中的11種禁用酸性染料，具有處理簡單，重復性好等特點，采用超聲波清洗器提取，并通過高速離心機離心，提取時間短，提取效率高，方法簡便、快速，適合各類干果中11種禁用酸性染料的同時測定，具有良好的應用方法。

技術領域

本發明涉及一種基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，屬于食品安全測量技術領域。

背景技術

近年來，干果的需求量伴隨著人們生活水平的提高而逐年增長，從而使干果的制作規模不斷擴大。在促進了干果產業的迅速發展的同時，不法商販常以價格便宜、著色穩定、不易褪色的酸性染料非法添加在干果中，以次充好，從中謀取暴利，此行為對國內消費及國際出口大宗特色干果制品造成嚴重的影響。

研究證實工業酸性染料具有較強的致毒、致癌作用。因此，在GB 2760-2014《食品添加劑使用標準》中禁止酸性染料作為食品添加劑使用，但是，目前尚無出臺相關一次性檢測干果中多種酸性染料的國家標準方法，現行SB/T 10920-2012《食品中禁用物質酸性橙染料的檢測高效液相色譜法》僅針對單一種類酸性橙染料進行檢測，而對多種類摻雜的酸性染料的檢測存在較大的局限性；又由于干果的基質較為復雜，并且干果中存在多種(10種以上)被濫用的酸性染料的同時測定方法未見報道。因此，如何加強干果中酸性染料的檢測研究，對非法添加工業染料的監測以及保證食品安全具有重要意義，也是當前繼續解決的問題。

發明內容

本發明目的是為了克服現有技術中沒有對干果中存在多種(10種以上)被濫用的酸性染料的同時測定方法的問題。本發明的基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，能夠通過超高效液相色譜法測定干果中的11種禁用酸性染料，具有處理簡單，重復性好等特點，采用超聲波清洗器提取，并通過高速離心機離心，提取時間短，提取效率高，方法簡便、快速，適合各類干果中11種禁用酸性染料的同時測定，具有良好的應用方法。

為了達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一種基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，包括以下步驟，

步驟(A)，標準儲備液和標準工作液的配制

(A1)，選擇標準試劑品，包括乙腈、乙酸銨；

(A2)，分別稱取0.025g的各種標準試劑品，用水溶解并定容于25mL的棕色容量瓶中，且均配制成質量濃度為1000μg/mL的標準儲備液；

(A3)，將配置的各種標準儲備液，在4℃下保存；

((A4)，取各種標準儲備液，用水混合稀釋，制得所需濃度的標準工作液，乙腈標準工作液的質量濃度為850μg/mL，乙酸銨標準工作液的質量濃度為為550μg/mL；

(A5)，將標準工作液密封，并于在4℃下保存，以供使用；

步驟(B)，干果樣品預處理

(B1)，將干果樣品粉碎，混合均勻后稱取5.0g樣品，加入到20mL的乙腈標準工作液；

(B2)，通過超聲波清洗器提取，并通過高速離心機離心，得到清液；

步驟(C)，固相萃取處理

(C1)，取離心過的清液5mL加入活化過的免疫親和柱，即依次通過1％吐溫-20的1％吐溫-20的PBS 4mL和PBS 3mL淋洗，用10mL的試管盛接淋洗液；