[發明專利]基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法

在審

• 申請號: 201810282999.1
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN108519447A
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 劉俊;楊忠;向麗;劉建;王翀;殷新;陳斌武;王梁;孫濤;雷勇輝
• 申請（專利權）人: 新疆出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 蘇州集律知識產權代理事務所(普通合伙) 32269
• 代理人: 安紀平

1.基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，其特征在于：包括以下步驟，

步驟（A），標準儲備液和標準工作液的配制

（A1），選擇標準試劑品，包括乙腈、乙酸銨；

（A2），分別稱取0.025 g的各種標準試劑品，用水溶解并定容于25 mL的棕色容量瓶中，且均配制成質量濃度為1000 μg/mL的標準儲備液；

（A3），將配置的各種標準儲備液，在4 ℃下保存；

（A4），取各種標準儲備液，用水混合稀釋，制得所需濃度的標準工作液，乙腈標準工作液的質量濃度為850μg/mL，乙酸銨標準工作液的質量濃度為為550μg/mL；

（A5），將標準工作液密封，并于在4 ℃下保存，以供使用；

步驟（B），干果樣品預處理

（B1），將干果樣品粉碎，混合均勻后稱取5.0 g樣品，加入到20 mL的乙腈標準工作液；

（B2），通過超聲波清洗器提取，并通過高速離心機離心，得到清液；

步驟（C），固相萃取處理

（C1），取離心過的清液5 mL加入活化過的免疫親和柱，即依次通過1%吐溫-20的1%吐溫-20的PBS 4 mL和PBS 3 mL淋洗，用10 mL的試管盛接淋洗液；

（C2），將盛接淋洗液的試管用氮吹儀吹干，用1 mL的乙腈標準工作液溶解定容，過膜處理后得到測定溶液，進行超高效液相色譜測定；

步驟（D），配置超高效液相色譜儀的色譜條件

色譜柱為symmtery shield RP18柱250×4.6 mm，5 μm；柱溫為30 ℃；檢測波長為500nm；流動相為1 mL的乙腈標準工作液和20 mmoL乙酸銨標準工作液；流速為1.0 mL/min；檢測器為紫外檢測器；進樣體積為10 μL；

步驟（E），通過超高效液相色譜對測定溶液內11種酸性染料進行色譜分析，得到干果內11種酸性染料的檢出量，所述11種酸性染料，包括酸性橙10、酸性紅1、酸性紅14、媒介紅3、酸性黑1、橙黃2、酸性黃73、酸性藍62、酸性黃116、酸性黑24、酸性棕282。

2.根據權利要求1所述的基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，其特征在于：（A2），分別稱取0.025 g的各種標準試劑品，稱重精確度為0.0001 g。

3.根據權利要求1所述的基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，其特征在于：所述20 mmoL乙酸銨標準工作液的pH=4.5。

4.根據權利要求1所述的基于超高效液相色譜法測定干果中多種酸性染料的方法，其特征在于：（B2），通過超聲波清洗器提取20 min，并通過高速離心機8000 r/min，離心5min，得到清液。