[發明專利]一種用于動物源性成分檢測的核酸組合及其應用

在審

• 申請號: 201810243917.2
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN108220457A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 劉菲;云振宇;周均;周航;張紅光;黃莉
• 申請（專利權）人: 四川華漢三創生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李佳

本發明公開了一種用于動物源性成分檢測的核酸組合及其應用，涉及肉制品檢測技術。本發明公開的核酸組合可檢測出待測樣品中的動物源性成分類別，具有較強的特異性、靈敏度和可靠性，其可以用制備動物源性成分檢測的試劑盒，為執法部門快速準確鑒別動物源性成分，提高職能部門的檢測能力提供了保障。

技術領域

本發明涉及肉制品檢測技術領域，具體而言，涉及一種用于動物源性成分檢測的核酸組合及其應用。

背景技術

食品安全關系著人們身體健康，關系著人民幸福感的提高。近年來，市場出現不法分子利用廉價低值肉制品冒出高價值肉制品，以次充好，甚至將一些未經檢驗檢疫的肉制品進行銷售。這些市場行為，大大損害消費者權益，同時也使人們對食品安全信任度降低，造成不良社會影響。為更好保證食品安全生產，急需開發一種快速準確的技術和商業化試劑盒來進行動物源性成分的高通量篩查，達到執法和檢測部門需求。

國內外對于動物源性成分的檢測報道主要有物理、化學、免疫學、普通PCR、等溫擴增、熒光定量PCR等方法，這些技術一般每次僅能檢測一種或兩種指標，無法全面分析檢測食品中所涉及的多種動物源性成分，這些方法不能很好滿足快速、大規模、高通量檢測的需求。因此研發一種快速、方便、靈敏度高、成本低、可視化和高通量的檢測方法將，有利于執法部門快速準確鑒別動物源性成分，提高職能部門的檢測能力，具有非常好的市場應用前景。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于動物源性成分檢測的核酸組合，該核酸組合可檢測出待測樣品中的動物源性成分類別，具有較強的特異性、靈敏度和可靠性。

本發明的另一目的在于提供上述核酸組合的應用，將其用于制備動物源性成分檢測試劑盒，有利于滿足對特異性好、靈敏度高、結果可靠的動物源性成分檢測試劑盒的需求。

本發明的另一目的在于提供一種動物源性成分檢測試劑盒，其含有上述的核酸組合，該試劑盒具有檢測快速、操作方便、靈敏度高、特異性強、檢測結果可視化、結果準確等諸多特點中的一種或多種特點，為執法部門快速準確鑒別動物源性成分，提高職能部門的檢測能力提供了保障。

本發明的另一目的在于提供一種動物源性成分的檢測方法，該檢測方法有檢測快速、操作方便、靈敏度高、特異性強、檢測結果可視化、結果準確等諸多特點中的一種或多種特點，為執法部門快速準確鑒別動物源性成分，提高職能部門的檢測能力提供了保障。

本發明是這樣實現的：

一種用于動物源性成分檢測的核酸組合，其包括如下引物對中的一種或多種的組合：

包括SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物的用于檢測豬源性成分的第一引物對；

包括SEQ ID NO.3所示的上游引物和SEQ ID NO.4所示的下游引物的用于檢測羊源性成分的第二引物對；

包括SEQ ID NO.5所示的上游引物和SEQ ID NO.6所示的下游引物的用于檢測驢源性成分的第三引物對；

包括SEQ ID NO.7所示的上游引物和SEQ ID NO.8所示的下游引物的用于檢測鼠源性成分的第四引物對；

包括SEQ ID NO.9所示的上游引物和SEQ ID NO.10所示的下游引物的用于檢測牦牛源源性成分的第五引物對。

其中，第一引物對可針對豬的COX1基因擴增，第二引物對可針對羊的Cytb基因擴增，第三引物對可針對驢的ND1基因擴增，第四引物對可針對鼠Cytb基因擴增，第五引物對可針對牦牛D-LOOP區擴增。

上述5種引物對可同時在同一體系中進行多重PCR，避免非特異性擴增，具有較高的特異性和靈敏度，此外，在多重PCR的基礎上還本發明提供的核酸組合還可同時進行非對稱PCR擴增技術(Asymmetric PCR)用以提高檢測靈敏度。