[發明專利]三嵌段納米金的構建及其應用在審
| 申請號: | 201810240763.1 | 申請日: | 2018-03-22 |
| 公開(公告)號: | CN110297083A | 公開(公告)日: | 2019-10-01 |
| 發明(設計)人: | 宓現強;王璐;王晨光 | 申請(專利權)人: | 中國科學院上海高等研究院;中國科學院大學 |
| 主分類號: | G01N33/53 | 分類號: | G01N33/53;G01N33/533;G01N33/532;G01N33/573 |
| 代理公司: | 上海碩力知識產權代理事務所(普通合伙) 31251 | 代理人: | 劉紅梅 |
| 地址: | 201210 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 熒光基團 納米金 三嵌段 納米金探針 報告序列 可調控 構建 介導 兩段 生物分子識別 生物技術領域 納米金顆粒 表面結合 連接識別 淬滅 探針 修飾 應用 組裝 檢測 | ||
1.一種納米金探針,其特征在于,包括納米金顆粒以及連接在所述納米金顆粒上的雙鏈探針、所述雙鏈探針包括第一條鏈,第二條鏈和第三條鏈。所述第一條鏈包括5'-3'依次排列的第一區段,第二區段和第三區段;所述第一區段和所述第二條鏈部分互補,所述第二區段為多聚腺苷酸區段,用于納米金表面錨定,所述第三區段和所述第三條鏈鏈部分互補。所述第二條鏈與所述第三條鏈分別用不同的熒光分子修飾。
2.根據權利要求1所述的三嵌段納米金探針,其特征在于,所述雙鏈探針通過Poly A連接在所述納米金顆粒上。
3.根據權利要求2所述的納米金探針,其特征在于,所述雙鏈探針的第一條鏈包括5'-3'依次排列的第一區段,第二區段和第三區段,所述Poly A結合在所述納米金顆粒表面。
4.根據權利要求2或3所述的納米金探針,其特征在于,所述Poly A的長度為30-50nt。
5.根據權利要求1所述的納米金探針,其特征在于,所述熒光基團修飾于所述第二條鏈的5’端和第三條鏈的3’端。
6.一種權利要求1-5任一項所述的納米金探針的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括如下步驟:
(1)將所述第一條鏈和所述第二條鏈,第三條鏈雜交,得到雙鏈探針;
(2)將步驟(1)得到的所述雙鏈探針和納米金顆粒混合,得到混合液;
(3)將步驟(2)得到的混合液的pH調至酸性,靜置第一預設時間后,再調至中性,靜置第二預設時間后,離心,去掉上清,獲得所述納米金探針。
7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,在所述步驟(1)中,第二條鏈與第三條鏈與加入的第一條鏈的比值為1.2~1.5;所述將步驟(2)得到的雙鏈探針和納米金顆粒混合為,將每500~1000摩爾的雙鏈探針和1摩爾的納米金顆粒混合;所述步驟(3)中的第一預設時間為5~15min,第二預設時間為15~20min;所述步驟(3)中離心條件為11500~12000rmp,
14~17min。
8.一種非疾病診斷目的的檢測目標分子的方法,包括如下步驟:將目標分子和如權利要求1-6任一項所述的納米金探針混合,再進行熒光值檢測。
9.如權利要求1-6任一項所述的納米金探針在制備生物小分子檢測試劑中的應用。
10.一種核酸檢測試劑盒,包括如權利要求1-6任一項所述的納米金探針。
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