[發明專利]厭氧真菌來源抗抑制性木聚糖酶的克隆、表達及其應用在審
| 申請號： | 201810214266.4 | 申請日： | 2018-03-15 |
| 公開（公告）號： | CN108570476A | 公開（公告）日： | 2018-09-25 |
| 發明（設計）人： | 陳紅歌;劉新育;謝夏;翟嘉奇;劉思奇 | 申請（專利權）人： | 河南農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/56 | 分類號： | C12N15/56;C12N9/24;C12N15/70;A23L7/10;A23L7/104 |
| 代理公司： | 河南科技通律師事務所 41123 | 代理人： | 樊羿;張曉輝 |
| 地址： | 450002 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 木聚糖酶 抑制性 厭氧真菌 克隆 應用 核苷酸序列 表達載體 蛋白序列 菌種分離 面粉加工 序列構建 嚴格條件 遺傳密碼 抑制蛋白 重組宿主 互補鏈 簡并性 抗性 雜交 | ||
1.一種編碼厭氧真菌來源的抗抑制性木聚糖酶核酸序列，其DNA序列選自：
a）：含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的DNA序列，或
b）：編碼SEQ ID NO.2所示蛋白序列的DNA序列，或
c）：在嚴格條件下可與a）或b）的DNA序列雜交的DNA序列，或
d）：由于遺傳密碼的簡并性而與a）、b）或c）中DNA序列相關的DNA序列，或
e）：a）、b）、c）或d）中DNA序列的互補鏈。
2.一種含權利要求1所述DNA序列的表達載體。
3.一種由權利要求2所述表達載體轉化而得的重組宿主菌。
4.一種由權利要求1所述核酸序列編碼、權利要求2所述表達載體表達或權利要求3所述重組宿主菌分離的厭氧真菌來源的抗抑制性木聚糖酶。
5.權利要求4所述厭氧真菌來源抗抑制性木聚糖酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）構建權利要求1所述核酸序列的重組表達載體；
（2）將重組表達載體導入宿主菌構建重組宿主菌；
（3）發酵培養重組宿主菌后，離心收集菌體；
（4）破碎菌體，離心后收集上清液，得粗酶液；
（5）利用親和層析純化粗酶后，得抗抑制性木聚糖酶。
6.權利要求4所述厭氧真菌來源抗抑制性木聚糖酶在抗XIP-I型抑制蛋白中的應用。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述木聚糖酶的酶反應溫度控制為40℃～70℃。
8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述木聚糖酶的酶反應pH控制為3.0～7.0。
9.權利要求4所述厭氧真菌來源抗抑制性木聚糖酶在面粉加工領域中的應用。
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