[發明專利]一種復合微生物菌劑制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201810203791.6
• 申請日: 2018-03-13
• 公開（公告）號: CN108384723B
• 公開（公告）日: 2020-11-10
• 發明（設計）人: 張金萍;李雪彬
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院亞熱帶林業研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05G1/00;C05F17/20;C05F5/00;C05F11/00;C12R1/645
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 周希良;李欣瑋

本發明公開了一種復合微生物菌劑，該菌劑由擔子菌、粗毛革孔菌和黃孢原毛平革菌混合而成，其中擔子菌、粗毛革孔菌和黃孢原毛平革菌的體積比為1:(1?3):(1?3)。本發明還公開了上述復合微生物菌劑的制備方法以及其在木質素和纖維素降解中的應用。本發明中的微生物菌劑易于培養，操作方便，成本低廉，能夠將木質素和纖維素降解，特別是用于對高木質素含量的山核桃殼和高纖維素含量的馬尾松木屑堆肥中，對木質素和纖維素的降解率大于50％，降解效果好。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，特別是涉及一種復合微生物菌劑制備方法及其應用。

背景技術

植物材料主要成分是纖維素、半纖維素和木質素，是可利用性的糖類來源，許多具有高木質素和纖維素含量的材料來源于不同經濟活動的廢棄物，尤其是經濟林生產加工過程中的廢棄物如油茶果殼(纖維素18.62％、半纖維素49.34％、木質素29.71％)、板栗果殼(纖維素27.34％、半纖維素33.23％、木質素21.40％)、山核桃果殼(纖維素20.63％、半纖維素22.48％、木質素49.78％)、馬尾松木屑(纖維素47.47％、半纖維素28.20％、木質素33.66％)等，富含纖維素、半纖維素和木質素以及礦物質元素，與泥炭形成的原材料成分相同，上述材料是替代泥炭的新型資源。試驗表明，常規堆肥過程中，半纖維素是非常容易降解的成分，而纖維素只能部分降解，木質素在整個堆肥過程中，幾乎不降解。

纖維素是由葡萄糖分子通過β-(1，4)鍵鏈接的聚合物，它包含7000-15000個葡萄糖單元，由于它具有的線性本性和在同一鏈上或不同鏈上的羥基之間的氫鍵相互作用，纖維素形成非常穩定的難于斷裂的晶體微纖。木質素是一個非常復雜的酚類聚合物，主要由苯基丙烷單元組成，通過C-C鍵和C-O-C鍵鏈接苯基丙烷單元，形成三維穩定的無定型結構。木質素包圍著纖維素和半纖維素一起填充于微原纖維之間，與細胞壁成分緊密結合，構成一體，以防止過多水分和有害物質滲入植物的細胞壁，對植物有支持和保護作用。因此木質素與細胞壁緊密結合使其結構非常穩定，難以降解。

近幾十年來，國內外學者一直尋找降解木質纖維素的最佳途徑，尤其近年來對微生物降解木質纖維素的研究成為熱點。例如：中國專利CN1896254B公告了一種混合菌群降解發酵木質纖維素類物質生產酒精的方法，其利用釀酒酵母菌和纖維素降解菌降解糖化發酵底物，最終得到成品酒精，該專利中利用的纖維素降解菌為芽孢桿菌、纖維桿菌、瘤胃球菌、鏈霉菌、木霉、曲霉中的一種或幾種組成。中國專利CN101597580B公告了一種降解木質纖維素的分解菌系L-C CCTCC NO:M208165，其能夠將木質纖維素初步降解，并用作肥料以改善和保持土壤肥，變廢為寶。本專利相對于前兩個專利，操作簡單，速率快。

發明內容

本發明的目的在于提供一種復合微生物菌劑，提供上述復合微生物菌劑的制備方法，以及上述復合微生物菌劑的應用。

為了達到本發明的目的之一，本發明采取以下技術方案：

一種復合微生物菌劑，由擔子菌、粗毛革孔菌和黃孢原毛平革菌混合而成，其中擔子菌、粗毛革孔菌和黃孢原毛平革菌的體積比為1:(1-3):(1-3)。

本發明的粗毛革孔菌的特征特性為菌絲系統三體型；生殖菌絲透明，薄壁，多扭曲，具鎖狀聯合，直徑3-5μm；骨架菌絲有色，厚壁到實心，直徑3.5-5μm；纏繞菌絲無色，厚壁，彎曲，多分枝，直徑1-2μm，擔孢子圓柱形，透明，薄壁，平滑。

本發明的黃孢原毛平革菌的特征特性為在馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基上培養7天，菌落長滿平皿，表面平坦，顏色乳白色，質地絨狀，無滲出液和可溶性色素產生，菌落反面呈黃褐色。

為了達到本發明的目的之二，本發明采取以下技術方案：

一種上述的復合微生物菌劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將擔子菌、粗毛革孔菌和黃毛原毛平革菌菌株分別接種于馬鈴薯葡萄糖培養基試管斜面上，30℃靜置培養5-7d；