[發明專利]一種定量檢測牛奶中β-內酰胺酶殘留的熒光微球檢測卡

有效

• 申請號: 201810189187.2
• 申請日: 2018-03-08
• 公開（公告）號: CN108445217B
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 武玉香;唐世云;沈志強
• 申請（專利權）人: 山東綠都生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/573;G01N33/558
• 代理公司: 寧波甬致專利代理有限公司 33228
• 代理人: 李迎春

1.一種定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，所述檢測卡包括依次相連接的吸水墊、基膜、聚酯纖維6613膜，其特征在于，所述聚酯纖維6613膜上有加樣區和微球區，微球區載有第一抗β-內酰胺酶單克隆抗體時間分辨熒光微球，所述基膜上設置有檢測線T線和質控線C線，所述檢測線T線上包被有第二抗β-內酰胺酶單克隆抗體，質控線C線上包被有羊抗鼠IgG的抗體；所述第一抗β-內酰胺酶單克隆抗體由保藏編號為CCTCC NO. C2017278的雜交瘤細胞株13E4分泌得到或保藏編號為CCTCC NO. C2017279的雜交瘤細胞株18B9分泌得到；所述第二抗β-內酰胺酶單克隆抗體由保藏編號為CCTCC NO. C2017278的雜交瘤細胞株13E4分泌得到或保藏編號為CCTCC NO. C2017279的雜交瘤細胞株18B9分泌得到，所述第一抗β-內酰胺酶單克隆抗體和第二抗β-內酰胺酶單克隆抗體不同時相同。

2.根據權利要求1所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：所述吸水墊為吸水紙，所述基膜為硝酸纖維素膜。

3.根據權利要求1所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：所述時間分辨熒光微球的粒徑范圍為200-600nm。

4.根據權利要求3所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：所述時間分辨熒光微球的制備是采用抗β-內酰胺酶的單抗包被醛基修飾的熒光微球，時間分辨熒光微球的懸浮保存液配方組成為pH 8.5的0.01M Tris緩沖液，內含3%蔗糖、10% 牛血清白蛋白、0. 5%聚乙二醇20000、0.1%疊氮鈉。

5.根據權利要求1所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：檢測線T線抗體終濃度為0.5mg/mL，質控線C線終濃度0.5mg/mL；檢測線T與質控線C噴膜液量都為0.5μL/cm；所述時間分辨熒光微球噴膜量為10μL/cm。

6.根據權利要求1所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：檢測線T線包被緩沖液配方成分為pH 7.0的0.01M Tris緩沖液，內含10% 牛血清白蛋白、0. 5%聚乙二醇20000、0.1%疊氮鈉；質控線C線包被緩沖液配方成分為pH 7.0的0.01M PBS緩沖液，內含10% 牛血清白蛋白、0. 5%聚乙二醇20000、0.1%疊氮鈉。

7.根據權利要求1所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，其特征在于：所述定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡采用雙抗體夾心法模式的免疫層析定量檢測；所述檢測卡為定量檢測，檢測牛奶中β-內酰胺酶殘留的最低檢測限為1×10^-6U/mL，并且牛奶樣本直接檢測，無需任何樣本處理過程。

8.一種牛奶中β-內酰胺酶殘留量的檢測方法，其特征在于：采用權利要求1-7中任意一項所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡進行檢測，所述牛奶樣本直接檢測，無需任何樣本處理過程。

9.權利要求1-7中任意一項所述的定量檢測β-內酰胺酶殘留的檢測卡，在牛奶檢測中的應用。