[發(fā)明專利]一種人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810186519.1 | 申請日: | 2018-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN108486077A | 公開(公告)日: | 2018-09-04 |
| 發(fā)明(設計)人: | 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅 | 申請(專利權(quán))人: | 天津市湖濱盤古基因科學發(fā)展有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/10 | 分類號: | C12N9/10;C12N15/54;C12Q1/6883;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 300300 天津*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 酰基轉(zhuǎn)移酶 突變蛋白 甘油 磷酸 肥胖癥 糖尿病 單克隆抗體 診斷和治療 基因檢測 基因芯片 基因診斷 制備 應用 疾病 分析 研究 | ||
1.一種人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2的突變蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
2.一種人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的編碼基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一種基因芯片,其特征在于,包括:固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針;所述核苷酸探針根據(jù)所述人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的核苷酸序列,與人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2正常蛋白的核苷酸序列的比對結(jié)果確定。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因芯片,其特征在于,所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列。
5.一種特異性識別人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的單克隆抗體,其特征在于,其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO:1所示。
6.一種用于檢測人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒,其特征在于,所述ELISA試劑盒包括:包被有權(quán)利要求5所述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、檢測對象的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2蛋白、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述用于檢測人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒,其特征在于,所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。
8.一種基于權(quán)利要求6或7所述ELISA試劑盒檢測人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的抗體的方法,其特征在于,包括:
a、使用所述包被緩沖液對權(quán)利要求5所述單克隆抗體進行稀釋,并將稀釋后的所述單克隆抗體加樣至ELISA酶標板的孔中,室溫孵育;
b、使用所述樣品稀釋液將檢測對象的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2蛋白稀釋成不同濃度梯度,并將不同濃度梯度的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2蛋白分別加樣至ELISA酶標板的孔中,室溫孵育;
c、甩去各孔中的液體,加入所述ELISA酶標板洗滌液,洗滌并甩干;
d、加入所述酶標二抗,并室溫孵育;
e、甩去各孔中的液體,加入所述ELISA酶標板洗滌液,洗滌并甩干;
f、加入所述顯色液,室溫避光孵育,并加入所述終止液終止反應;
g、在酶標儀上測定波長為450nm處的吸光值。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述ELISA試劑盒檢測人的甘油三磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶2突變蛋白的抗體的方法,其特征在于,進一步包括:空白對照實驗。
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