[發(fā)明專利]一種具有免疫原性的cry1C重組蛋白、分離的核酸分子及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810173003.3
• 申請(qǐng)日: 2018-02-28
• 公開（公告）號(hào): CN108314711B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金永梅;林秀峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C07K14/325
• 分類號(hào): C07K14/325;C12N15/32;C12N15/11;C07K16/12;C07K16/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 吳嘯寰

本發(fā)明提供一種具有免疫原性的cry1C重組蛋白，涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。編碼該cry1C重組蛋白的氨基酸序列長(zhǎng)度短于全長(zhǎng)cry1C蛋白的氨基酸序列，且該cry1C重組蛋白能夠與cry1C抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，能夠用于快速高效地制備cry1C抗體。本發(fā)明還提供一種編碼上述具有免疫原性的cry1C重組蛋白的核酸、能夠擴(kuò)增或檢測(cè)該核酸分子的引物對(duì)以及包括該核酸分子的載體和宿主細(xì)胞，此外，本發(fā)明還提供一種cry1C抗體及其制備方法，該制備方法能夠快速高效地獲得cry1C抗體。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種具有免疫原性的cry1C重組蛋白、分離的核酸分子及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis Berliner,簡(jiǎn)稱Bt)能產(chǎn)生對(duì)多種昆蟲有害的殺蟲晶體蛋白(Insecticidal Crystal proteins,ICPs)。Bt殺蟲晶體蛋白(ICP)可特異性毒殺不同的昆蟲，包括鱗翅目、鞘翅目、雙翅目、螨類等害蟲，而對(duì)人畜無(wú)害，是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因育種中主要使用的抗蟲蛋白。

水稻是我國(guó)的重要糧食作物之一。水稻害蟲是水稻豐產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)的重要限制因子之一，每年給我國(guó)水稻生產(chǎn)造成的損失量可占總產(chǎn)量的5％～10％，其中鱗翅目害蟲是水稻生產(chǎn)危害最大的害蟲。

cry1C基因編碼的Bt殺蟲蛋白可以抑制和殺死鱗翅目害蟲。利用生物技術(shù)手段將cry1C基因?qū)氲礁鞣N植物中，包括水稻、大豆、玉米以及油菜等，能夠獲得對(duì)抗鱗翅目害蟲具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，國(guó)內(nèi)外大量的轉(zhuǎn)基因植物已進(jìn)入生物安全評(píng)價(jià)階段，部分產(chǎn)品已進(jìn)入商業(yè)化階段。現(xiàn)有的cry1C抗體制備時(shí)間長(zhǎng)，且成本高，如何快速、精準(zhǔn)地檢測(cè)cry1C蛋白及其相關(guān)產(chǎn)品是如今面臨的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種具有免疫原性的cry1C重組蛋白，其氨基酸序列長(zhǎng)度短于全長(zhǎng)cry1C蛋白的氨基酸序列，且能夠與cry1C抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，用于快速高效地制備cry1C抗體。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種分離的核酸分子，其能夠編碼上述具有免疫原性的cry1C重組蛋白，該核酸分子能夠在宿主細(xì)胞中能夠高效表達(dá)該cry1C重組蛋白，且該cry1C重組蛋白的氨基酸序列長(zhǎng)度短于全長(zhǎng)的cry1C蛋白的氨基酸序列，該cry1C重組蛋白能夠與cry1C抗體發(fā)生免疫反應(yīng)且用于高效快速地制備cry1C抗體。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種能夠擴(kuò)增或檢測(cè)上述核酸分子的引物對(duì)。

本發(fā)明的第四目的在于提供一種載體，其包括有上述核酸分子。

本發(fā)明的第五目的在于提供一種宿主細(xì)胞，其包括有上述核酸分子和上述載體。

本發(fā)明的第六目的在于提供上述蛋白在制備cry1C抗體中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第七目的在于提供一種制備上述cry1C重組蛋白的方法。

本發(fā)明的第八目的在于提供一種cry1C抗體的制備方法，其能夠快速、高效地制備出該抗體，具有成本低、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的第九目的在于提供一種cry1C抗體，其由上述制備方法制得。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種具有免疫原性的cry1C重組蛋白，該蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

一種分離的核酸分子，其編碼上述蛋白，該核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

一種擴(kuò)增或檢測(cè)上述核酸分子的引物對(duì)。

一種載體，其包括有上述核酸分子。

一種宿主細(xì)胞，其包括上述核酸分子或上述載體。