[發明專利]一步法同時檢測HSV-1,HSV-2,VZV皰疹病毒的試劑盒及檢測方法有效
| 申請號: | 201810172541.0 | 申請日: | 2018-03-01 |
| 公開(公告)號: | CN108441580B | 公開(公告)日: | 2021-09-28 |
| 發明(設計)人: | 楊尚鑫;王一芳;劉杰;褚偉峰;潘玲玲 | 申請(專利權)人: | 紹興迅敏康生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/6806;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向慶寧 |
| 地址: | 312071 浙江省紹興市*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一步法 同時 檢測 hsv vzv 皰疹病毒 試劑盒 方法 | ||
1.一種檢測α亞型的人皰疹病毒HSV-1,HSV-2,VZV三聯檢測試劑盒,該試劑盒由下列成分組成:裂解液和磁珠懸浮液,其中,裂解液的成分由下列成分組成:1M NaCl、0.01%Triton-X 和0.001M KCl,磁珠懸浮液包括羥基修飾的磁珠,多分散系數<0.2;磁珠為直徑小于或等于500nM,其中,磁珠的含量為10mg/mL;其中,該試劑盒還包括HSV-1,HSV-2,VZV分別對應的引物和探針序列,所述的HSV-1的引物和探針序列為SEQ NO:1.1、SEQ NO:1.2和SEQ NO:1.3所示; 所述的HSV-2的引物和探針序列為SEQ NO:2.1、SEQ NO:2.2和SEQ NO:2.3所示;所述的VZV的引物和探針序列為 SEQ NO:3.1、SEQ NO:3.2和SEQ NO:2.3所示。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,其中,當裂解液和磁珠溶液混合后,兩者的體積比為200:1。
3.根據權利要求2所述的試劑盒,其中,該試劑還包括一種混合物,該混合物為溶液混合物,該混合物由下列成分組成:裂解成分和磁珠,其中裂解成分由下列成分組成:1MNaCl、0.01%Triton-X和0.001M KCl,磁珠為0.005mg的羥基磁珠。
4.根據權利要求3所述的試劑盒,其中,該試劑盒還包括PCR反應擴增的所必須的成分,所述的擴增試劑包括1~10mmol/L的Mg2+,10~50mmol/L的Tris –HCl緩沖液;濃度25mmol/L的K離子,100μg/ml的酶穩定性試劑,甘油。
5.根據權利要求4所述的試劑盒,其中該試劑盒還包括:陰性對照、HSV-1,HSV-2,VZV陽性對照,說明書和盒體組成。
6.根據權利要求1-5之一所述的試劑盒,其中,采用所述試劑盒檢測的樣本為血清、尿液、漱口水、胸水、腹水、腦脊液或者房水樣本,該樣本可以直接用于核酸提取;或者,采用所述試劑盒檢測的樣本為鼻咽拭子、痰液類樣本,其中拭子或者痰液樣本溶于1-5mL生理鹽水中。
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