[發明專利]三酶一酵理療液的生產方法

在審

• 申請號: 201810169057.2
• 申請日: 2018-02-28
• 公開（公告）號: CN108295111A
• 公開（公告）日: 2018-07-20
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 安徽精準醫療產業研究院有限公司
• 主分類號: A61K36/481
• 分類號: A61K36/481;A61P29/00;A61K35/648;A61K35/646;A61K35/64;A61K35/62;A61K35/583
• 代理公司: 蕪湖安匯知識產權代理有限公司 34107
• 代理人: 尹婷婷

本發明公開了一種三酶一酵理療液的生產方法，包括以下步驟：以全蝎、僵蠶、水蛭、蜈蚣、烏梢蛇、伸筋草、透骨草、雪蓮花、艾葉、黃芪相互配伍作為原料，粉碎后經纖維素酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解后再經枯草芽孢桿菌發酵，制備得到理療液。該理療液對風濕疼痛有良好的緩解及治療作用。

技術領域

本發明涉及三酶一酵理療液的的生產方法。

背景技術

風濕性疾病是以關節痛、畏風寒為主癥的一組極其常見的臨床癥候群，泛指影響骨、關節、肌肉及其周圍軟組織，如滑囊、肌腱、筋膜、血管、神經等一大組疾病。

目前治療風濕性疾病的理療液，多是對蟲、草類藥物采用水提或煎煮提取出有效成分之后制備成相應的外用液體制劑，這樣的提取方法雖然簡單，但是在提取的過程中有效成分的損失較多，且提取出的蟲類藥物的蛋白質成分破壞嚴重且不利于人體的吸收，從而致使療效降低。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了一種三酶一酵理療液的生產方法。利用纖維素酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶對蟲草類中藥進行酶解，并將酶解液經枯草芽孢桿菌發酵后制備得到可用于治療風濕疼痛的外用理療液。該方法所得的理療液中經酶解和發酵之后富含藥物多糖、小肽等多種成分，利于人體的消化吸收，可快速作用于病灶，緩解風濕疼痛。

本發明采取的技術方案為：

三酶一酵理療液的生產方法，包括如下步驟：

S1：按照以下重量份配比準備原料：全蝎3～6份、僵蠶2～5份、水蛭1～3份、蜈蚣4～8份、烏梢蛇2～5份、伸筋草5～10份、透骨草5～10份、雪蓮花2～6份、艾葉10～15份、黃芪3～6份；

S2：將各原料混合粉碎至粒徑在100目以下，加入蒸餾水浸泡30～60min，配制得到原料液，并調節原料液的pH，然后加入纖維素酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶進行酶解；

S3：酶解完成后，將酶解液放入發酵罐中，接入枯草芽孢桿菌發酵；

S4：發酵完成后，將發酵液離心，滅菌，灌裝，即可得到所述理療液。

進一步地，所述步驟S1中，按照以下重量份配比準備原料：全蝎4份、僵蠶5份、水蛭2份、蜈蚣5份、烏梢蛇4份、伸筋草8份、透骨草6份、雪蓮花4份、艾葉12份、黃芪4份。

所述步驟S2中，原料和蒸餾水的料液比為1g：10～15mL；使用HAc調節體系的pH為6.0～6.5。由于纖維素酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶的最適pH范圍依次為4.5～6.0、6.0～7.0、7.0～7.5，因此6.0～6.5的pH范圍兼顧了三種酶的最佳pH，且接近于中性，便于后續直接進行發酵反應，無需進一步調節體系的酸堿度，從而簡化操作。

所述步驟S2中，纖維素酶的添加量為1000～1500U/g，優選為1200U/g。

所述步驟S2中，木瓜蛋白酶的添加量為500～800U/g，優選為650U/g。

所述步驟S2中，中性蛋白酶的添加量為700～1000U/g，優選為800U/g。

所述纖維素酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶的酶活力分別為≥100000U/g、≥800U/g、≥500000U/g。

所述步驟S2中，酶解的溫度和時間分別為50～65℃酶解3～6h，優選為55℃酶解5h。

所述步驟S3中，枯草芽孢桿菌按照常規的培養方法擴大培養至活菌數為3～5×10⁸cfu/g再加入到酶解液中，所述枯草芽孢桿菌的接種量為酶解液質量的0.1～0.5％，優選為0.3％；發酵的溫度和時間分別為45～55℃發酵6～8h，優選為50℃發酵7h。

本發明還提供了根據上述生產方法制備得到的理療液。