[發(fā)明專利]一種花色苷高效液相色譜檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810168562.5 | 申請日： | 2018-02-28 |
| 公開（公告）號： | CN108445127B | 公開（公告）日： | 2020-08-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 袁麗;孫楚楚;黨慶玲;高瑞昌 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇大學(xué) |
| 主分類號： | G01N30/88 | 分類號： | G01N30/88;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/54 |
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| 地址： | 212013 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 花色 高效 色譜 檢測 方法 | ||
1.一種花色苷高效液相色譜檢測方法，其特征在于按照下述步驟進行：
(1)pH＝2的檸檬酸溶液的配制、液相流動相的配制；
(2)花色苷溶液的量取；
(3)花色苷黃烊鹽化；
(4)過膜：0.22μm水相濾膜；
(5)高效液相測定：色譜柱：C18柱，250mmX4.6mmX5μm；流動相：A液為含體積分數(shù)為1％甲酸的水溶液，B液為含有體積分數(shù)為1％甲酸的乙腈溶液；檢測波長：525nm柱溫：35℃；進樣量：20μL，進行梯度洗脫；
(6)標曲：將花色苷溶液稀釋不同倍數(shù)，用高效液相檢測，根據(jù)不同濃度的出峰面積做出標準曲線；
(7)數(shù)據(jù)處理：在AgiLent 1260配制的離線數(shù)據(jù)處理軟件上進行，確定出峰時間，去雜峰，手動加峰，記錄峰面積；利用軟件進行數(shù)據(jù)處理；
(8)最后根據(jù)樣品出峰面積，以外標法算得花色苷濃度；
其中步驟(1)中所述的pH＝2的檸檬酸溶液的配制方法如下：稱取3.84g一水合檸檬酸，溶于100mL蒸餾水中，用pH計測試，再用檸檬酸和0.1MNaOH微調(diào)；液相流動相的配制方法如下：A液，準確量取10mL甲酸注入1000mL容量瓶中，用超純水定容至1000mL；B液，準確量取10mL甲酸注入1000mL容量瓶中，用乙腈定容至1000mL；
其中步驟(3)中所述的花色苷黃烊鹽化方法如下：將量取的花色苷溶液與配制好的檸檬酸溶液1:1混合震蕩1min；
其中步驟(5)中所述的高效液相測定步驟中的梯度洗脫方法如下表：
時間min 流速mL/min 流動相A％ 流動相B％ 0.0 0.8 92.0 8.0 2.0 0.8 88.0 12.0 5.0 0.8 82.0 18.0 10.0 0.8 80.0 20.0 12.0 0.8 75.0 25.0 15.0 0.8 70.0 30.0 18.0 0.8 55.0 45.0 20.0 0.8 20.0 80.0 22.0 0.8 92.0 8.0 30.0 0.8 92.0 8.0
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