[發明專利]一種高活性乳酸菌固態制劑的制備方法

在審

• 申請號: 201810165716.5
• 申請日: 2018-02-28
• 公開（公告）號: CN108048381A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發明（設計）人: 趙路;吳鵬;劉曉峰;趙巖;宋宵因;劉寶龍;楊少飛
• 申請（專利權）人: 蘇州昆藍生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/23;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/01
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• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種高活性乳酸菌固態制劑的制備方法，以糖蜜、玉米漿為主要碳源氮源，降低培養基成本，通過三段pH調控技術，大大地提高了發酵水平。將發酵液經離心后的液體部分處理后回用，保留了乳酸菌的有效代謝產物，同時對乳酸起到了良好的保護作用。本發明的制備方法，工藝簡單、操作容易、生產效率高，且制備的乳酸菌活菌數高，穩定性好，易于儲存。

技術領域

本發明涉及乳酸菌的生產技術領域，特別是涉及一種高活性乳酸菌固態制劑的制備方法。

背景技術

乳酸菌在調節機體腸道方面起著維持各種益生菌群的生態平衡，降低血清中的膽固醇濃度，代謝產生的乳酸，使周圍環境的酸度降低，抑制腸道內雜菌的生長繁殖，同時也促進營養物質的吸收和利用。因此，乳酸菌被廣泛應用于輕工業、食品工業、醫藥及飼料工業等各種行業上。

乳酸菌生長繁殖需要復雜的營養物質，傳統的乳酸菌發酵多選用MRS培養基，價格昂貴。同時由于發酵后期營養物質不足和代謝產物（主要是乳酸）積累抑制菌體生長，導致發酵水平低，變相的增加了成本。

乳酸菌在生產、加工、保存和應用過程中，極易失活，對高溫、胃酸、膽鹽等的抵抗力差，特別是在高溫加工過程和通過胃環境時會大量死亡，從而降低生物活性作用，導致使用效果的重復性和穩定性較差。

因此，通過優化發酵工藝，提高發酵水平，降低生產成本，以及通過添加保護劑及特定的制劑技術，增加乳酸菌的穩定性及耐受性，提高乳酸菌的存活率及活性，具有重大意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種高發酵水平、高活性的乳酸菌固態制劑的制備方法。

一種高活性乳酸菌固態制劑的制備方法，包括以下步驟：

（1）取乳酸菌菌種按5~10%的接種量接種于滅菌后的種子培養基中，在30~40℃靜置培養15~20h，培養后即得種子液；

（2）將種子液按10~15%的接種量接種于發酵培養基中，在30~40℃培養40~48h，即得成熟發酵液，發酵過程中攪拌轉速30～50rpm，發酵液pH降低到4.5后，按每升培養基流加糖蜜5~10g/小時的比例添加糖蜜，同時通過流加氫氧化鈣控制pH4.5～5.0,發酵30h后控制pH4.0～4.5；

（3）將成熟發酵液4000～6000rpm離心10～15min，分別得到菌泥和發酵液液體部分，將該液體部分經板框過濾、超濾、活性炭脫色和真空濃縮，得到固形物30%～40%的濃縮液；

（4）向步驟（3）中的菌泥中添加保護劑，混合均勻，得到菌泥保護劑混合物，保護劑各組分占菌泥質量百分比分別為低聚果糖0.3~0.5%、β-環糊精2～3%、維生素C 0.1～0.3%、大豆分離蛋白1～2%、海藻酸鈉2～3%；

（5）將步驟（4）得到的菌泥保護劑混合物與步驟（3）中的濃縮液混合，并添加占濃縮液中固形物質量百分比20～30%抗性淀粉、0.5～1%卡拉膠、0.2～0.5%黃原膠，混合均勻，制得軟材；

（6）將步驟（5）制得的軟材，放入擠出滾丸機中制粒，制粒條件為600～800轉/分鐘下處理10～15分鐘，制粒后在40～50℃下干燥至水份5～8%，即得高活性乳酸菌固態制劑；

其中，步驟（1）中所述種子培養基成分為：糖蜜60~80g/L、酵母浸膏10~15g/L、玉米漿10~15g/L、磷酸二氫鉀1~2g/L、硫酸鎂0.5~1g/L、硫酸錳0.2~0.5g/L、吐溫-80 0.5～1%、碳酸鈣8~10g/L，步驟（2）中所述發酵培養基成分為：糖蜜150~200g/L、酵母浸膏20~30g/L、玉米漿30~50g/L、磷酸二氫鉀2~3g/L、硫酸鎂0.5~1g/L、硫酸錳0.2~0.5g/L、吐溫-80 0.5～1%、碳酸鈣20~30g/L；