[發明專利]馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測引物及其檢測方法在審
| 申請號: | 201810154051.8 | 申請日: | 2018-02-22 |
| 公開(公告)號: | CN108192992A | 公開(公告)日: | 2018-06-22 |
| 發明(設計)人: | 王曉丹;呂典秋;胡林雙;閔凡祥;楊帥;張靜華;高云飛;魏琪;董學志;王文重;馬紀 | 申請(專利權)人: | 黑龍江省農業科學院植物脫毒苗木研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109 | 代理人: | 賈澤純 |
| 地址: | 150086 黑龍*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 細極鏈格孢 病原菌 分子檢測引物 馬鈴薯植株 病害 傳統生物學 檢測靈敏度 馬鈴薯檢測 鏈格孢屬 引物序列 檢測 引物 種間 馬鈴薯 | ||
1.馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測引物,其特征在于所述的引物序列如序列表Seq ID No:1所示和Seq ID No:2所示。
2.馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測方法,其特征在于它是按照以下步驟進行的:
一、以提取待檢測的馬鈴薯基因組DNA為模板,采用權利要求1的引物,進行PCR擴增;
二、取PCR產物進行凝膠電泳檢測,若能夠檢測出240bp大小的片段,則可判斷出所檢測的馬鈴薯中存在細極鏈格孢病原菌。
3.根據權利要求2所述的馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測方法,其特征在于所述的細極鏈格孢病原菌為細極鏈格孢Alternaria tenuissima。
4.根據權利要求2所述的馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測方法,其特征在于所述的PCR反應體系為20μL如下:
PCR擴增條件為:5℃預變性1min,94℃變性30sec,54℃退火30sec,72℃延伸30sec,72℃終延伸8min,共29個循環。
5.根據權利要求2所述的馬鈴薯植株葉斑類病害細極鏈格孢病原菌的分子檢測方法,其特征在于在PCR檢測成功后,將PCR產物純化后,進行測序,進行Blast比對和同源性分析。
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