[發(fā)明專利]一種改良賴氨酸脫羧酶、生產(chǎn)方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810150350.4
• 申請(qǐng)日: 2018-02-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110157750B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳玲;劉修才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海凱賽生物技術(shù)股份有限公司;CIBT美國(guó)公司
• 主分類號(hào): C12P13/00
• 分類號(hào): C12P13/00;C12N9/88;C12N15/60;C12R1/01
• 代理公司: 北京律智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11438
• 代理人: 于寶慶;崔香丹

1.一種利用表達(dá)改良型賴氨酸脫羧酶的宿主細(xì)胞對(duì)賴氨酸進(jìn)行脫羧的方法，所述改良型賴氨酸脫羧酶由SEQ?ID?NO：8所示的序列組成，或者由SEQ?ID?NO：7所示的序列編碼，其中所述宿主細(xì)胞中cadA基因起始密碼子上游序列SEQ?ID?NO:17被替換為SEQ?ID?NO:18，所述方法包括使所表達(dá)的改良型賴氨酸脫羧酶與賴氨酸接觸的步驟。

2.一種賴氨酸脫羧酶的生產(chǎn)方法，所述方法包括培養(yǎng)含有核苷酸序列SEQ?ID?NO：7所示的序列的宿主細(xì)胞。

3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞在30℃至42℃溫度下培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞在30℃或42℃的溫度下培養(yǎng)。

5.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞選自大腸桿菌(E.coli)，枯草芽孢桿菌(B.subtilis)，天藍(lán)色鏈霉菌(S.coelicolor)，蜂房哈夫尼菌(H.alvei)和谷氨酸棒狀桿菌(C.glutamicum)。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞是蜂房哈夫尼菌(H.alvei)。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述宿主細(xì)胞是不含有內(nèi)源性質(zhì)粒的蜂房哈夫尼菌。

8.如權(quán)利要求5所述的方法，其中宿主細(xì)胞中轉(zhuǎn)化有包含SEQ?ID?NO.7和SEQ?ID?NO.18所示序列的質(zhì)粒。

9.如權(quán)利要求5所述的方法，其中賴氨酸脫羧反應(yīng)在6.0至8.0的pH下進(jìn)行。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中賴氨酸脫羧反應(yīng)在6.0或8.0的pH下進(jìn)行。

11.一種多核苷酸，其序列為SEQ?ID?NO：7。

12.一種賴氨酸脫羧酶，其由SEQ?ID?NO：8所示的序列組成。