[發明專利]一種加米霉素的含量檢測方法

在審

• 申請號: 201810139440.3
• 申請日: 2018-02-11
• 公開（公告）號: CN110146599A
• 公開（公告）日: 2019-08-20
• 發明（設計）人: 梁秀婷;魏秀麗;蘇玉輝;孟雙雙;馬春媚;王海挺;劉全才;張傳津
• 申請（專利權）人: 齊魯動物保健品有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 陳桂玲

本發明公開了一種加米霉素的含量檢測方法，該方法為高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比60?75:25?40:0.1的乙腈?水?濃氨溶液為流動相，測波長為208nm?220nm；流速為0.8ml/min?1.2ml/min；柱溫為30℃?40℃，外標法對樣品進行定量。相比現有技術，本發明采用常規檢測設備，流動相體系穩定，檢測數據可靠；所述方法簡便，專屬性、重現性、精密度、線性、準確度良好，加米霉素純度佳，不受雜質干擾；色譜峰相對不前延、不拖尾，峰形對稱性好。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種加米霉素的含量檢測方法。

背景技術

加米霉素是第二代大環內酯類氮雜7α類抗生素，分子式為C₄₀H₇₆N₂O₁₂，分子量為777.04，化學名稱為(2R,3S,4R,5S,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核-己吡喃糖基)氧]-2-乙基-3,4,10-三羥基-3,5,8,10,12,14-六甲基-7-丙基-11-[[3,4,6-三脫氧-3-(二甲氨基)-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧雜-7-氮雜環十五烷-15-酮。結構式為：

與阿奇霉素、泰拉菌素、泰地羅新等大環內酯類藥物一樣，加米霉素對呼吸系統疾病的治療效果優良，藥物濃度易在肺部組織蓄積，維持有效血藥濃度達10周以上，可以有效治療和預防溶血性曼氏桿菌、多殺性巴氏桿菌、睡眠嗜組織菌引起的牛呼吸系統疾病，在獸醫臨床上具有廣泛的應用前景。

但是，通過文獻檢索可以發現，加米霉素的質量標準，并未收載在USP美國藥典、EP歐洲藥典、JP日本藥典、IP印度藥典等國外藥典中，對于該藥物含量的定量檢測分析方法無法查詢到統一的法規標準依據。其中，在專利CN201310745236中給出了“一種加米霉素的含量檢測方法”，其流動相體系為乙腈：0.025mol/ml磷酸氫二鉀溶液(pH8-8.5)＝70:30，在該流動相體系中緩沖鹽組分用量較大，受環境等因素影響易出現流動相析出問題，而高效液相設備(HPLC)的流通管線均比較細，進而影響檢測數據穩定性或造成儀器設備堵塞等問題；專利CN201510027705中給出了“一種加米霉素的含量檢測方法”，其檢測器要求使用蒸發光散射檢測器，相對于應用最為廣泛的紫外檢測器、二極管陣列檢測器等，該檢測器相對特殊，使得該方法的使用受到限制。

發明內容

本發明針對現有技術存在的缺陷或不足，提供一種加米霉素的含量檢測方法，以解決現有技術中，利用高效液相色譜法檢測加米霉素時，存在的流動相體系及檢測數據不穩定，或者需要特殊檢測器的問題。

本發明的技術方案如下：

一種加米霉素的含量檢測方法，該方法為高效液相色譜法，包括如下步驟：

色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比60-75:25-40:0.1的乙腈-水-濃氨溶液為流動相，測波長為208nm-220nm；流速為0.8ml/min-1.2ml/min；柱溫為30℃-40℃；理論板數按加米霉素峰計算應不低于5000；

供試品的制備：取加米霉素精密稱定，用乙腈水溶液定量稀釋制成每lml中含0.5-1.5mg的溶液；

對照品的制備：取加米霉素對照品，同上供試品的制備方法制備；

測定法：分別精密量取上述溶液10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法以峰面積計算，即得。

根據本發明優選的，上述加米霉素含量檢測方法，儀器選用高效液相色譜儀Agilent DAD檢測器或Waters 2998檢測器，均為藥企檢測常用檢測器。