[發(fā)明專利]一種制備細(xì)菌菌影的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810139232.3
• 申請(qǐng)日: 2018-02-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108410785B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王春來(lái);劉思國(guó);于申業(yè);李剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所(中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心哈爾濱分中心);哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N15/70;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/19
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 張瑩

1.一種制備細(xì)菌菌影的方法，包括將INP信號(hào)序列和裂解盒基因E-lysis克隆到同一個(gè)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化細(xì)菌，其中INP信號(hào)序列為SEQ ID NO:1表示的序列，裂解盒基因E-lysis的序列為SEQ ID NO:2表示的序列，其中所述方法進(jìn)一步包括將外源抗原基因克隆在緊鄰所述INP信號(hào)序列的下游，其中外源抗原基因?yàn)樨i圓環(huán)病毒PCV2的Cap蛋白基因，其中所述Cap蛋白基因序列為SEQ ID NO:3所示的序列，其中所述細(xì)菌是大腸桿菌。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法進(jìn)一步包括在誘導(dǎo)外源抗原基因表達(dá)后，將培養(yǎng)溫度從37℃升高到42℃以上，誘導(dǎo)裂解盒基因E-lysis的表達(dá)。

3.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述表達(dá)載體是原核表達(dá)載體。

4.權(quán)利要求3所述的方法，其中所述載體是pET-28a。

5.一種表達(dá)載體，其包含INP信號(hào)序列，外源抗原基因和裂解盒基因E-lysis，其中INP信號(hào)序列為SEQ ID NO:1表示的序列，裂解盒基因E-lysis的序列為SEQ ID NO:2表示的序列，所述外源抗原基因緊鄰所述INP信號(hào)序列的下游，其中所述外源抗原基因?yàn)樨i圓環(huán)病毒PCV2的Cap蛋白基因，其中所述Cap蛋白基因序列為SEQ ID NO:3所示的序列。

6.權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體，其中所述表達(dá)載體是原核表達(dá)載體。

7.權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體，其中所述表達(dá)載體是pET-28a。

8.一種細(xì)菌菌影，其通過(guò)權(quán)利要求1所述的方法制備得到。

9.權(quán)利要求8所述的細(xì)菌菌影在制備豬圓環(huán)病毒疫苗中的應(yīng)用。