[發明專利]DNA液晶生物傳感器及其制備方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201810137110.0
• 申請日: 2018-02-10
• 公開（公告）號: CN108333179B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發明（設計）人: 熊興良;劉慧龍;陳龍聰;江奇鋒;梁波
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學
• 主分類號: G01N21/84
• 分類號: G01N21/84;C12Q1/6825
• 代理公司: 深圳市興科達知識產權代理有限公司 44260
• 代理人: 賈慶

1.一種DNA液晶生物傳感器，其特征在于：包括捕獲探針和隔離探針混合固定于表面鍍有一層納米級厚度金膜的玻片上而制成的工作片基，所述捕獲探針由含有m個腺嘌呤A和與待檢測物特異性識別結合的一段堿基序列P組成，并標記為A_mP₁；所述隔離探針含有n個腺嘌呤A的多聚腺嘌呤，并標記為A_n，所述m為正整數，所述n為自然數，所述捕獲探針與隔離探針的濃度比y為7:5，此外還包括取向片基，所述取向片基上放置有銅載網，所述銅載網內注入有列向液晶。

2.根據權利要求1所述的DNA液晶生物傳感器，其特征在于：所述捕獲探針和隔離探針的總濃度x為3μmol/L。

3.根據權利要求1所述的DNA液晶生物傳感器，其特征在于：所述m為15，n為15，所述堿基序列P的堿基數量為10～30個。

4.根據權利要求1所述的DNA液晶生物傳感器，其特征在于：所述金膜包括3nm的鉻粘附層和10nm金膜層。

5.一種權利要求1～4任一項所述的DNA液晶生物傳感器的制備方法，包括工作片基的制備、取向片基的制備，其特征在于所述工作片基的制備為：

a、玻片鍍金處理：在清洗后的玻片表面鍍上一層厚度均勻的金膜得到鍍金基底；

b、配制DNA探針固定液并制成工作片基：將捕獲探針A_mP₁和隔離探針A_n溶于緩沖液中并混合制成DNA探針固定液，然后將DNA探針固定液固定于所述鍍金基底上，制成工作片基；所述捕獲探針A_mP₁的面密度通過所述DNA探針固定液的濃度、捕獲探針與隔離探針的濃度比、m和n的值進行調節。

6.根據權利要求5所述的DNA液晶生物傳感器的制備方法，其特征在于所述取向片基的制備為：將另一玻片清洗后并浸泡于液晶取向劑溶液中孵育，反應后經超純水沖洗后吹干，再于烘箱中高溫烘烤交聯反應，經表面硅烷偶聯處理后的液晶分子垂直取向，制成取向片基。

7.一種權利要求1～4任一項所述的DNA液晶生物傳感器的檢測方法，其特征在于：采用滴涂法將一定量的待測液滴加在所述工作片基表面，捕獲探針與待測液中的目標檢測物在室溫下進行孵育反應，2h后用緩沖液、超純水順序沖洗，氮氣吹干，再在所述取向片基上放置一銅載網，注入液晶，然后蓋上經分子識別反應后的工作片基，最后，將取向片基和工作片基夾具固定，組成三明治結構的液晶盒，將所述液晶盒于偏光顯微鏡下觀察并采集圖像，通過圖像的明暗程度及驗收實現對待測液的半定量檢測。

8.根據權利要求7所述的DNA液晶生物傳感器的檢測方法，其特征在于：所述液晶為向列相液晶，包括5CB、E7。