[發明專利]一種澄廣花中的三萜類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810103501.0
• 申請日: 2018-02-01
• 公開（公告）號: CN108358991B
• 公開（公告）日: 2020-11-10
• 發明（設計）人: 楊柳;趙偉;洪鎏;楊繼;段沅杏;鞏效偉;田永峰;趙楊;朱東來;陳永寬
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;A01N37/40;A01P1/00;A01P3/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生;于洪

1.一種澄廣花中的三萜類化合物，其特征在于，結構式如式（I）所示：

，式（I）。

2.權利要求1所述的澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟（1），浸膏提取：將干燥的澄廣花粉碎到30-50目，以體積百分比濃度為70-95%乙醇水溶液在室溫下進行提取2-4次，每次6-10h，合并提取液，過濾，得濾液，減壓濃縮得浸膏；

步驟（2），硅膠柱層析：將步驟（1）得到的浸膏上硅膠柱層析，裝柱硅膠為200-300目；以石油醚和丙酮混合有機溶劑進行梯度洗脫，體積比依次為15:1、7:1、3:1和1:1，收集各梯度的梯度洗脫液并濃縮，經TLC監測，合并相同的部分并濃縮，得到A-D四部分；

步驟（3），高壓液相色譜分離分離：將步驟（2）得到的B部分再用體積比為15:1-2:1氯仿和丙酮的混合溶劑進行梯度洗脫，得到B1-B6六部分；將B2部分經高壓液相色譜分離純化，即得式（I）所示的澄廣花中的三萜類化合物；

步驟（3）所述的高壓液相色譜分離純化是采用采用20mm×250mm，5μm的C₁₈色譜柱，以甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為4:6-6:4，流速為10-14mL/min，紫外檢測器檢測波長為254nm，每次進樣180-220μL，收集10-12 min樣品的色譜峰，多次累加后蒸干，得到蒸干物。

3.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，所述的步驟（1）中乙醇水溶液的體積百分比濃度為70%。

4.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，所述的步驟（1）中每次提取時乙醇水溶液的體積與澄廣花的質量比為8-12L:1Kg。

5.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，步驟（1）得到的浸膏在經硅膠柱層析前，用浸膏重量1.5-4倍量的體積濃度為95%甲醇水溶液進行溶解，然后用浸膏質量2-4倍的100目硅膠攪拌至混合均勻，之后上樣。

6.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，裝柱所用硅膠重量為浸膏重量3-5倍。

7.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，所述的步驟（2）所述的梯度洗脫程序為：洗脫時，洗脫液流量為每秒一滴，每0.5-1.0L洗脫液進行減壓濃縮，當濃縮浸膏質量小于1g，即更換梯度；

所述的步驟（3）中，梯度洗脫時，氯仿和丙酮的體積比依次為15:1、15:2、15:3、15:4、15:5、15:7.5；梯度洗脫程序為：洗脫時，洗脫液流量為每秒一滴，每0.5-1.0L洗脫液進行減壓濃縮，當濃縮浸膏質量小于1g，即更換梯度。

8.根據權利要求2所述澄廣花中的三萜類化合物的制備方法，其特征在于，高效液相色譜分離純化后得到的蒸干物用甲醇溶解，再以甲醇為流動相，用凝膠柱層析分離純化，分離時按照接收液體積計算，接收第120-150 mL洗脫液，然后濃縮，即得到式（Ⅰ）所示化合物純品；其中，凝膠色譜分離純化使用的是Sephadex LH-20凝膠柱。

9.權利要求1所述澄廣花中的三萜類化合物作為制備抗菌劑的應用。