[發明專利]催化谷氨酰胺合成靛藍獲得藍色花卉的轉基因方法有效
| 申請號： | 201810095829.2 | 申請日： | 2018-01-31 |
| 公開（公告）號： | CN108330146B | 公開（公告）日： | 2020-06-02 |
| 發明（設計）人： | 張雁;陳義華;南迦納杰·阿瑟·安卡拉哈里;胡逸靈;李鵬偉 | 申請（專利權）人： | 天津大學;中國科學院微生物研究所 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/60;C12N15/54;A01H5/00;A01H6/56;A01H6/74;A01H6/30;A01H6/62 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 陸藝 |
| 地址： | 300072*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 催化 谷氨酰胺 合成 靛藍 獲得 藍色 花卉 轉基因 方法 | ||
1.催化谷氨酰胺合成靛藍獲得藍色花卉的轉基因方法，其特征包括如下步驟：
1)選取編碼磷酸泛酰巰基乙胺基轉移酶的Sfp基因和編碼靛藍合成酶的bpsA基因，分別克隆在含植物啟動子的質粒的植物啟動子下游；
2)將步驟1)獲得的質粒，在大腸桿菌中擴增，并轉入土壤農桿菌；
3)利用土壤農桿菌介導把含Sfp和bpsA的DNA轉入花卉中；
所述花卉為玫瑰或月季。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述Sfp基因的核苷酸序列為SEQ ID NO.1所示。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征是所述Sfp基因所編碼的磷酸泛酰巰基乙胺基轉移酶的氨基酸序列為SEQ ID NO.2所示。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述bpsA基因的核苷酸序列為SEQ ID NO.3所示。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述bpsA基因所編碼的靛藍合成酶的氨基酸序列為SEQ ID NO.4所示。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征是Sfp基因上游的植物啟動子CHSp的核苷酸序列為SEQ ID NO.5所示。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征是bpsA基因上游的植物啟動子RhAGp的核苷酸序列為SEQ ID NO.6所示。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述含植物啟動子的質粒為pBI121。
9.根據權利要求1所述的方法，其中所述Sfp基因來源于枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。
10.根據權利要求1所述的方法，其中所述bpsA基因來源于淡紫色鏈霉菌(Streptomyces lavendulae)。
11.根據權利要求1所述的方法，其中所述Sfp基因和bpsA基因的密碼子根據所述花卉的密碼子偏好性進行優化。
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